中文摘要：

α常春藤皂苷是中药白头翁中的抗肿瘤活性成分，体外对肝癌Bel-7402细胞和SMMC-7721细胞，体内对小鼠肝癌H22实体瘤和人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤，均具有显著的抑制活性。N-乳糖酰壳聚糖是壳聚糖的衍生物，体内可生物降解，能特异性识别肝实质细胞表面的去唾液酸糖蛋白受体。B7-1分子被公认为T细胞活化的最基本的协同刺激信号，在多种肿瘤细胞表面高度表达，可被抗人B7-1单克隆抗体4E5特异性识别。本课题结合受体介导与抗体介导的主动靶向机制，制备α常春藤皂苷-抗人B7-1单克隆抗体的N-乳糖酰壳聚糖纳米粒。对纳米粒的体内外抗肿瘤活性、肝肿瘤靶向性及靶向机制、纳米粒吸收机制等进行系统研究，并结合荧光标记及同位素标记技术对纳米粒在体内外的吸收、分布等药动学过程进行动态在线研究。

结论摘要：

本课题以肝肿瘤细胞上的ASGPR和CD147分子为靶标，采用N-乳糖酰壳聚糖和CD147单抗分别实现受体介导与抗体介导，以α-常春藤皂苷为模型药物，将其制备成双重复合机制介导的肝肿瘤主动靶向纳米给药系统。采用修饰法制备的α-Hed-GC-CD147-NP，平均粒径为（139.53±4.17）nm，药物分散均匀，CD147单抗的修饰量为1.25μg/mgNP，顺利实现了同时包载脂溶性药物和水溶性单抗，且较好的保留了单抗的结合活性。体外研究表明，α-Hed及其含药纳米粒对HepG2和SMMC-7721两种细胞均有显著的抑制作用，并能诱导细胞凋亡，且呈现剂量依赖性；α-Hed-GC-CD147-NP的细胞毒作用及细胞摄取率最高，明显优于其他几种纳米粒，与HepG2细胞的亲和力更强，具有良好的肝肿瘤细胞靶向性。体内研究表明，各纳米粒小鼠尾静脉注射的LD50均在12mg/kg以上，远高于原料药；各剂量组对荷HepG2细胞裸鼠肿瘤的抑制率IRw均在70%以上，远高于原料药中剂量组；具有双重复合介导机制的α-Hed-GC-CD147-NP，低、中、高3个剂量组的抑瘤率均在80%以上，显示了更好的肝肿瘤靶向性。荷瘤裸鼠近红外荧光成像实验结果表明，经受体或抗体介导的纳米粒，肿瘤和肝脏靶向性更强。药动学研究结果表明，药物在大鼠体内呈双室模型，α-Hed-GC-NP、α-Hed-CS-CD147-NP及α-Hed-GC-CD147-NP的t1/2(α)分别为0.12、0.10、0.05h，t1/2(β)分别为0.97、2.30、1.93h，与原料药相比，各纳米粒体内消除减慢。以α-Hed的AUC为参照，上述3种纳米粒的生物利用度显著提高，分别为120%、300%及280%。抗体或受体介导的纳米粒，在肝脏和肿瘤组织内的药物量远远高于其他组织，具有极显著性差异，显示了良好的肝脏和肿瘤靶向性。双重复合机制介导纳米粒α-Hed-GC-CD147-NP在荷瘤裸鼠的肝脏和肿瘤内的分布量最高，优于单一抗体或受体介导纳米粒。