青光眼是一种最常见的不可逆性致盲眼病,治疗方法以手术降低眼压为主,但Tenon's囊成纤维细胞过度增值导致术后滤过泡瘢痕形成是青光眼滤过术失败的主要原因,TGF-beta在结膜瘢痕形成中有重要作用,与TGF-beta Ⅱ型受体结合是发挥生物学效应的关键步骤,封阻该受体可以抑制TGF-beta致纤维化作用,从而降低组织纤维化的发生,提高抗青光眼滤过术的成功率。本研究我们构建RNA随机突变库、以体外重组TGF-beta sRⅡ为靶蛋白进行SELEX实验、共进行8轮循环筛选,通过膜结合实验检测筛选所得RNA富集库对TGF-beta sRⅡ亲和性的进化状态,凝胶阻滞实验检测亲和核酸序列与TGF-beta sRⅡ的结合强度。结果显示,RNA富集库沿着与靶蛋白TGF-beta sRⅡ亲和性加强的方向进化,从富集库中分离出序列A和序列B优势序列,膜结合实验显示该两类序列对TGF-beta sRⅡ有明显亲和性。进一步的研究正在进行中。
英文主题词SELEX; recombined human TGF-beta sRⅡ; affinity; fibrosis