中文摘要：

本研究从间充质干细胞（Mesenchymal stem cell， MSCs）向软骨分化角度着手，运用中药指纹图谱、流式细胞仪、RT-PCR、免疫组织化学、基因芯片、基因报告载体、基因转染等技术，观察补肾益精中药代表方左归丸对MSCs向软骨分化过程中关键基因表达影响。首先，制备左归丸含药血清，中药指纹图谱鉴定血清中药物成分。接着，分离培养大鼠和人MSCs，体外诱导向软骨细胞分化，诱导同时以左归丸含药血清刺激细胞。结果左归丸能通过抑制细胞凋亡途径促进MSCs细胞增殖；左归丸能促进软骨细胞关键成分II型胶原基因和蛋白多糖表达；运用基因芯片技术从全基因组角度观察左归丸含药血清对MSCs向软骨细胞定向分化过程中基因表达谱影响，结果显示左归丸干预后，差异表达基因涉及细胞通讯、细胞发育、编码软骨基质蛋白、基质金属蛋白酶、生长因子、转录因子、整合素和趋化因子等相关基因；Real-time PCR进一步发现左归丸能特异性促进SPARC，CCL25，CCL4基因表达；通过构建基因启动子荧光素酶报告基因载体，转染骨髓间质细胞系发现，左归丸上调SPARC表达主要通过显著增加SPARC启动子转录活性机制。