人肾癌细胞系GRC-1与β-榄香烯乳和空白乳分别培养,接受来自15MeV直线加速器不同剂量的射线照射。利用末端脱氧核苷酰转移法及流式细胞术检测实验与对照组细胞凋亡水平,计算分组放射增敏比、肿瘤细胞存活率、细胞集落/克隆形成数、肿瘤细胞潜在倍增时间和增殖细胞核抗原指数,评价β-榄香烯对肾癌细胞的体外放射增敏作用。建立兔VX2肾癌模型,对β-榄香烯乳和空白乳肾动脉灌注后的模型作分组照射,对比各组间肿瘤大小、形态学、抑瘤率等指标的变化,评价β-榄香烯对荷瘤动物体内肿瘤的放射增敏作用。利用显微组织切割法、激光捕获显微技术结合DNA基因芯片检测,发现源自体外培养和荷瘤动物肿瘤细胞中的差异表达基因,分析诸基因表达与放射增敏间的内在联系,探讨β-榄香烯的放射增敏作用机理。本研究旨在为莪术提取物有效成分β-榄香烯联合放射线治疗晚期肾癌技术的临床应用提供理论和实验基础。
人肾癌细胞系GRC-1与β-榄香烯乳和空白乳分别培养,在6MeV直线加速器不同剂量射线照射后,利用MTT法检测其对实验组与对照组细胞增殖抑制水平,流式细胞仪检测细胞周期与细胞凋亡,计算分组放射增敏比,发现β-榄香烯对肾癌细胞有体外放射增敏作用,可能机制为促进细胞凋亡及G2M期细胞阻滞;建立兔VX2肾癌模型及裸鼠ACHN人肾癌移植瘤模型,对空白组及β-榄香烯乳不同剂量组模型作分组照射,对比各组间肿瘤大小变化并计算抑瘤率,分析凋亡相关基因的表达变化情况,证实β-榄香烯对荷瘤动物体内肿瘤也具有放射增敏作用,可能与β-榄香烯促进肿瘤细胞凋亡有关;利用激光捕获显微切割联合表达谱基因芯片技术,发现源自体外培养和荷瘤动物肿瘤细胞中的差异表达基因约300余条,证实β-榄香烯乳对肾癌GRC-1及ACHN细胞的体内外放射增敏效应涉及原癌基因、抑癌基因等多种相关基因的变化,是一个多基因参与的复杂事件;综合体内体外实验结果证实β-榄香烯乳是一种新的肾癌放疗增敏剂,具体的分子机制尚待进一步的研究。