中文摘要：

区域淋巴结转移是头颈部鳞癌生存率长久无法改善的主要原因是之一，其分子机制尚不明确。前期研究表明血管生成拟态这一新的血管生成模式与淋巴结转移有关，但机制不明。上皮-间充质转化也在肿瘤转移中发挥重要作用，并与血管生成拟态在肿瘤细胞的塑形和细胞骨架的改变有许多共同点。本研究，在体外应用基因转染技术改变头颈部鳞癌细胞中Twist的表达水平，揭示上皮-间充质转化相关分子表达的变化，对肿瘤细胞管状结构形成、侵袭和迁移能力及细胞黏附的影响；在体内，通过用不同Twist表达水平的细胞株建立裸鼠移植瘤模型，进一步验证上皮-间充质转化在肿瘤血管生成拟态形成中的作用机制，并揭示其时空规律。进而在人体组织标本中进一步阐明Twist诱导的上皮-间充质转化可能通过细胞黏附及细胞骨架的改变参与头颈部鳞癌中血管生成拟态形成，从而促进淋巴结转移。对于预测预后，控制头颈部鳞癌的转移寻求新的治疗靶点具有重要意义。

结论摘要：

区域淋巴结转移是头颈部鳞癌生存率长久无法改善的主要原因是之一，其分子机制尚不明确。前期研究表明血管生成拟态这一新的血管生成模式与淋巴结转移有关，但机制不明。上皮-间充质转化也在肿瘤转移中发挥重要作用，并与血管生成拟态在肿瘤细胞的塑形和细胞骨架的改变有许多共同点。通过检测头颈部鳞癌中两种血液供应模式内皮依赖性血管及血管生成拟态，证实喉癌组织中两种血液供应模式共存，证实在喉癌中存在血管生成拟态这一新的血供模式，与头颈部鳞癌的浸润转移有关，是其独立预后因素。并在动物移植瘤模型中阐明了两种血液供应模式的时空规律。本研究，在体外应用基因转染技术改变头颈部鳞癌细胞中Twist的表达水平，揭示上皮-间充质转化相关分子表达的变化，对肿瘤侵袭和迁移能力及细胞黏附的影响；在体内，通过用不同Twist表达水平的细胞株建立裸鼠移植瘤模型，后期将进一步验证上皮-间充质转化在肿瘤血管生成拟态形成中的作用机制。进而在人体组织标本中进一步阐明Twist诱导的上皮-间充质转化可能通过细胞黏附及细胞骨架的改变参与头颈部鳞癌中血管生成拟态形成，从而促进淋巴结转移。对于预测预后，控制头颈部鳞癌的转移寻求新的治疗靶点具有重要意义。本研究进一步深入探讨EphA2在头颈部鳞癌血管生成拟态形成的作用机制。体外应用 SiRNA 技术降低EphA2在头颈部鳞癌细胞株中的表达， 通过划痕试验、化学趋化试验及侵袭和迁移试验检测细胞的侵袭和迁移能立；三维培养技术检测细胞的管状结构形成能力；免疫印迹技术检测上皮-间充质转换相关分子的表达变化。EphA2降表达导致头颈部鳞癌细胞株侵袭和迁移能力降低；体外细胞的管状结构形成能力降低；上皮-间充质转换相关分子的表达发生逆转。提示EphA2 通过启动上皮-间充质转换在头颈部鳞癌生成拟态形成过程中起到关键作用。