中文摘要：

缺血缺氧性肺损伤是围手术期常见的病理损伤，Ⅱ型肺泡上皮（ATⅡ）细胞在损伤后的组织修复中发挥重要作用。我们的前期研究显示静脉麻醉药异丙酚预处理能拮抗缺氧导致的大鼠ATⅡ细胞凋亡、促进细胞生存，其机制与异丙酚对"缺氧- HIF-1（缺氧诱导因子-1）- Bnip3"通路的抑制有关。近年研究发现Ⅱ型程序性细胞死亡－自噬，与凋亡一起参与了缺氧性损伤后细胞命运的调控。由此我们推测异丙酚预处理的肺保护效应，不仅与拮抗凋亡有关，可能也涉及对自噬的调控。基于此，本课题组拟采用原代培养的大鼠ATⅡ细胞缺氧模型，通过Western blot、免疫共沉淀及siRNA等技术，从细胞生存状态及胞内信号转导两方面，研究异丙酚预处理对缺氧ATII细胞自噬的影响及可能机制。从调控自噬的角度，为研究异丙酚在缺血缺氧性肺损伤中的保护作用提供实验依据。

结论摘要：

肺缺血缺氧性损伤是临床常见的病理损伤，麻醉药用于肺损伤保护的研究一直备受关注。异丙酚是一种临床上广泛应用的静脉麻醉药，近年来因器官保护效应被广泛用于肺保护的研究。本课题组拟研究异丙酚预处理对缺氧早期II型肺泡上皮细胞自噬的影响及可能机制。我们首先验证了缺氧条件下会诱导II型肺泡上皮细胞自噬反应，异丙酚可以有效减少II型肺泡上皮细胞缺氧引起的自噬反应，20μmol/L是异丙酚的最佳作用浓度。其次我们通过药物干预实验，分别添加mTOR、PI3K抑制剂及ROS清除剂来阻断自噬调控环节，通过western blot的方法来检测II型肺泡上皮细胞内自噬相关蛋白LC3-I，LC3-II和Bnip3的表达。结果表明Bnip3在自噬过程中被诱导表达，mTOR信号通路参与缺氧诱导的自噬反应。之后我们采用siRNA技术观察Bnip3基因沉默对Bnip3可能涉及的自噬调控环节的影响，Western blot检测结果显示Bnip3基因的knock down可以有效减少缺氧条件引起的自噬反应。本研究从自噬的角度，为更好的开展自噬与肺损伤保护策略的研究提供重要的实验基础。