本课题通过研究水蛭炮制前后的药理作用与化学组成,探索水蛭炮制的科学合理性。药效作用采用凝血酶滴定法,凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT)研究了我国主流品种宽体金线蛭(Whitmania pigra Whitman)的抗凝血活性,结果表明水蛭具有抗凝血作用,药效比较为鲜品>生品>制品;利用红外光谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了水蛭及其炮制品的化学组成,发现水蛭的蛋白质含量丰富,水溶性蛋白含量为鲜品>生品>制品。鲜品中31KD的蛋白含量最高,生品与制品中22KD蛋白的含量最高。水蛭经过炮制后部分31KD的蛋白组分降解为22KD的。关联分析表明鲜品中31KD的活性蛋白可能是水蛭抗凝血活性的药效成分,说明水蛭中蛋白的含量及其存在形式与药效明显相关,炮制对药效有影响,温度越高,影响越大;可通过尽量降低加工温度最大可能地保持药效。此外,通过超滤、离子交换层析等分离纯化方法对水蛭鲜品进行了研究,得到12.9KD具有弹性蛋白酶活性的蛋白成分,该蛋白可能是水蛭抗凝血药效的物质基础之一。其作用机理有待进一步研究。
英文主题词Leech; Processing; Anticoagulant activity; Protein; Elastase