核转录因子NF-κB是一种广泛存在于各类细胞中的重要调控因子,也是机体对病原感染反应的关键调节因子,它参与机体免疫、炎症和凋亡等多种生理、病理过程,与疾病的发生有密切关系。近年来,细胞NF-κB信号转导异常同疾病的关联是生命科学研究的热点之一,而在畜牧兽医方面NF-κB研究不多,对其与疫病的关系所知甚少。本项目根据NF-κB信号转导途径的理论及相关研究成果,在我们原有工作的基础上,针对猪瘟病毒致病机制尚不清楚这一科学问题,以猪瘟病毒体内与体外感染及其编码蛋白与宿主机体/细胞NF-κB信号途径相互作用关系为主线,选择合适相关组织细胞、蛋白分子、细胞因子等作为研究对象,从不同层次和角度进行研究,以揭示猪瘟病毒感染引起细胞蛋白功能改变及免疫调控的分子机制,进而从新的角度了解猪瘟的发病机制,为防控猪瘟提供理论依据,也为猪瘟新型疫苗设计寻找新的途径,对控制猪瘟发生的难题具有重要意义。
NF-κB signaling pathway;Classical swine fever virus;Coding proteins;Molecular pathogenesis;
核转录因子NF-κB (nuclear factor-κB)是一种调控多种基因表达的重要因子,它参与免疫和炎症的发生、细胞增殖、细胞凋亡等多种生理、病理过程,与疾病的发生、发展有密切的关系。NF-κB作为机体对病原生物感染的早期反应过程中的关键调节因子,在宿主的免疫反应及炎症反应过程中发挥着极其重要的作用。本项目开展了猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)体内与体外感染及其编码蛋白与宿主机体/细胞NF-κB信号途径相互作用的研究。首先,以PK-15细胞为模型研究CSFV对PK-15细胞NF-κB信号通路的活性影响;其次,在前期的工作基础上进一步开展了CSFV体外感染猪树突状细胞(DC) NF-κB信号途径关系分析及免疫功能影响研究;再次,构建了猪瘟病毒Erns、E2、C等蛋白真核表达载体,研究猪瘟病毒编码蛋白对PK-15细胞NF-κB信号途径活化影响;接着,以传代免疫细胞猪肺泡巨噬细胞为模型,研究了猪瘟病毒感染对猪肺泡巨噬细胞NF-κB信号途径活化的影响;最后,研究了CSFV对猪体内外周血单核细胞(PBMC)NF-κB信号途径活化影响。 猪瘟病毒体外感染研究发现CSFV能抑制PK15细胞和DC细胞NF-κB信号途径活化,但在感染猪肺泡巨噬细胞时能明显激活NF-κB信号途径活化。在体内感染实验中发现CSFV感染抑制了PBMC细胞NF-κB信号途径活化。在对CSFV编码蛋白的研究中发现Erns、E2蛋白能抑制TNF-a诱导的NF-κB信号途径活化,C蛋白能够促进NF-κB信号途径活化。研究表明猪瘟病毒对于NF-κB信号途径活化有着复杂、精细的调控功能,NF-κB信号途径在猪瘟病毒免疫逃逸中起着重要的作用。该研究项目共发表研究性论文12篇,其中SCI论文10篇,中文核心2篇。获得国家发明专利1项。已经培养博士研究生2名,硕士研究生1名。目前有2名博士研究生和1名硕士研究生正在从事本课题相关内容后续研究。