中文摘要：

本研究将人工合成的生物素蛋白连接酶（BirA）识别多肽序列基因，与人乙酰胆碱受体（AChR）α亚单位（AChRα）基因连接，构建AChRα-BirA识别多肽序列基因。将含有这一重组基因的载体pcDNA3.1（AChRε-BirA识别多肽序列基因），转染中国仓鼠卵巢细胞（CHO），使AChRα-BirA识别多肽序列基因在CHO细胞膜上表达。表达产物经激光扫描共聚焦显微镜观察后确认，AChRα已经成功地表达在CHO细胞膜上。从细胞膜上提取和纯化AChR，再经SDS-PAGE和免疫印迹试验确证其分子量大小后，在BirA作用下与生物素连接，纯化后再与链亲和素连接，构建AChRα亚单位四聚体。AChRα四聚体纯化后，再经SDS-PAGE和免疫印迹试验予以确证。以构建的人AChRα四聚体作为抗原，以125-I-α-BT标记AChR，应用RIA检测抗乙酰胆碱受体抗体（AChRAb）和抗肌肉特异性激酶抗体（MuSKAb）均为阴性的MG患者血清。同时检测AChRAb阳性的MG患者血清AChRAb，并与传统的应用AChR单体作为抗原的RIA进行比较发现，构建的AChRα四聚体可以检测到AChRAb阳性的M