中文摘要：

采用昆明小鼠胚胎获得胚胎干细胞，利用免疫磁珠系统进行分离纯化后，在小鼠原代胚胎成纤维细胞滋养层上增殖建系。再将胚胎干细胞种植于脱细胞血管基质或人工可吸收血管基质材料上，通过体外定向诱导技术，使其分化为内皮细胞及平滑肌细胞，构建出血管三维模型，并在此血管模型的基础上，继续种植并培育胚胎干细胞，建立体外血管延伸培养体系；在成功培养血管的基础上，进一步研究培养血管的生物力学特性及其临床保存条件，并通过动物血管移植试验验证其生物活性及实用性。开展本课题的研究，可开发胚胎干细胞作为种子细胞在血管组织工程中的应用；定向诱导胚胎干细胞向复层组织结构分化；构建具有自我修复能力的全生物活性的血管工程组织；可以提供临床严重缺乏的血管组织；研究胚胎干细胞定向诱导分化的因素，可为其他组织及器官的培养提供参考和理论基础。

结论摘要：

胚胎干细胞的研究日趋成熟，国内外的研究取得了很大进展，目前的研究已经深入到基因水平。本实验主要通过对小鼠胚胎干细胞的定向诱导，探讨新的血管组织工程种子细胞，解决长久以来临床血管缺乏问题。主要研究内容胚胎干细胞的培养，胚胎干细胞诱导为血管内皮细胞，胚胎干细胞诱导为血管平滑肌细胞，血管支架的制备，诱导细胞的种植。研究成果包括成功培养胚胎成纤维细胞以及胚胎干细胞并建系；诱导胚胎干细胞为血管内皮细胞和平滑肌细胞成功，细胞纯度达到70%以上，并可以传代培养；制备出血管支架，并且种植诱导细胞体外培养成功，构建出三维血管模型，体内延伸尚处于研究阶段。关键数据胚胎成纤维细胞和胚胎干细胞培养照片，诱导细胞的免疫组织化学照片，逆转录-聚合酶链反应照片，流式细胞仪数据，体外构建成功组织工程血管等。开展本实验的科学意义可开发胚胎干细胞作为种子细胞在血管组织工程中的应用；定向诱导胚胎干细胞向复层组织结构分化；构建具有自我修复能力的全生物活性的组织工程血管；可提供临床严重缺乏的血管组织；研究胚胎干细胞定向诱导分化的因素；可为其他组织及器官的培养提供参考和理论基础。