中文摘要：

基因装载肝组织工程支架有望通过材料学与细胞生物学的融合实现体外诱导肝组织再生的三维仿生微环境的构建。本研究首先构建了含肝细胞生长因子红色荧光融合蛋白质粒基因，考察了壳聚糖/海藻酸复合聚电解质三维多孔支架基质组成和制备条件等对DNA/PEI纳米粒控制释放行为的影响，并考察了载基因支架三维共培养肝细胞/NIH3T3的细胞形态/功能。同位素标记质粒基因释放实验结果表明，随支架中聚阴离子海藻酸组分的提高不仅提高了支架的基因装载量并有效抑制了壳聚糖/海藻酸复合三维多孔支架中质粒基因的突释；同时，本研究优化的HGF基因装载壳聚糖/海藻酸复合支架用于肝细胞/NIH3T3细胞三维共培养，RT-PCR和ELISA检测结果进一步表明其显著提高了细胞的细胞转染效率及外源基因HGF的蛋白表达水平，同时促进了肝细胞聚集体的形成，其肝功能尿素合成能力也得到了显著的改善。由此可见，基因装载肝组织工程支架可有效改善细胞-基质、细胞-生长因子及细胞-细胞间的相互作用，将会成为一种具有应用前景的肝组织工程支架。