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百合ACC合成酶反义基因构建及其遗传转化
  • 项目名称:百合ACC合成酶反义基因构建及其遗传转化
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30371013
  • 申请代码:C1503
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:刘雅莉
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:西北农林科技大学
  • 批准年度:2003
中文摘要:

于百合呼吸跃变期提取总RNA,纯化mRNA;据已发表的植物1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase, ACC合成酶)基因的保守序列,设计合成特异引物,通过反转录PCR获得特异cDNA片段,连接pGEM-T Easy载体,克隆、测序并与GenBank中已有的ACC合成酶基因cDNA及氨基酸序列进行比较分析,确定ACC合成酶基因功能,登录GenBank;构建ACC合成酶反义基因表达载体;采用农杆菌介导法,将ACC合成酶反义基因导入百合栽培品种中去,并采用PCR、Southern blot及Northern blot进行分子鉴定;通过田间测定乙烯和开花期观测,最终获得延长开花期的百合新品系2-3个。

结论摘要:

百合花是世界主要的名贵鲜切花之一,全世界每年销量数以亿计,我国是百合原产地之一,切花生产面积与产量发展迅速。百合是一种乙烯释放跃变型花卉,花开放时乙烯大量释放,特别是采摘运输中机械损伤,可加速花朵乙烯释放高峰的到来,从而使花朵迅速衰老。通过克隆百合ACC氧化酶基因,构建了ACC氧化酶反义载体及RNA干扰载体,并转化百合,是从根本上解决这一难题的有效途径。研究结果我们已成功的从东方百合“索邦”、亚洲百合“普利安娜”中克隆了ACC氧化酶基因片段,并登陆GenBank(登录号分别为AY656735,AY656736,DQ062133和 DQ062134);构建了ACC氧化酶反义载体和RNAi载体;完成了农杆菌介导的反义ACC氧化酶基因表达载体及RNAi载体对百合的遗传转化,并获得3个百合品种转基因株系;本项目发表了相关论文6篇,在Hortscince发表摘要1篇;培养研究生4名。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 9
  • 1
  • 0
  • 0
  • 0
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