中文摘要：

本课题通过对正常大鼠与慢性坐骨神经压迫大鼠DRG中Cav2.2的mRNA及蛋白表达水平的比较，验证了Cav2.2与慢性疼痛的密切关系。利用重叠延伸PCR方法成功构建融合基因EGFP-e37a 和EGFP-e37b，建立了针对Cav2.2基因外显子e37a进行RNAi的siRNA筛选平台。根据siRNA的设计原则设计了四条长度为21bp的针对Cav2.2 e37a的siRNA，筛选出了干扰效果最佳的siRNAⅡ。将干扰序列包装至慢病毒载体系统，将该载体转染至DRG原代细胞中，膜片钳检测钙通道电流明显减弱。将该载体鞘内注射至CCI大鼠，能引起大鼠机械触觉诱发痛阈和热诱发痛阈的显著提高，并检测到大鼠DRG中Cav2.2 的mRNA和蛋白质水平的明显降低。大鼠转染该载体系统6周后未发现毒副作用，为解决难治性慢性神经痛提供了新思路。申请人所在课题组已发表论文4篇，申请国家专利一项，培养硕士研究生3名。