将大肠杆菌纯化内毒素作为免疫抗原免疫家兔,制备大肠杆菌内毒素的兔多克隆抗血清,结合多粘菌素B(PMB)对内毒素的吸附作用建立检测内毒素的酶免疫传感器;同时建立基于PMB与多克隆抗血清的酶联免疫吸附法(ELISA)检测内毒素。比较酶免疫传感器与ELISA方法的检测范围与检测限。酶免疫传感器法适宜条件PMB 10ug/mL,兔抗血清稀释度1:200,HRP标记驴抗兔IgG稀释度1:100;内毒素浓度(Y)与还原峰电流值(X)的回归方程y = 1.42ln(x) + 38.94,相关系数R2=0.85,检测限10ng/mL,检测范围0.01-100μg/mL。夹心ELISA法条件PMB 10μg/mL,兔抗血清稀释度1:500,HRP标记驴抗兔lgG稀释度1: 2000;内毒素浓度(Y)与O.D值(X)回归方程y = 0.094 ln(x) + 0.227,R2=0.914,检测限100ng/ml,检测范围0.1-100μg/mL。间接竞争ELISA法y = -0.1 ln(x) + 0.765,R2=0.982,检测限50ng/ml,检测范围0.05-100μg/ml。
英文主题词Endotoxin; PMB; Immunosensor; Polyclonal Antiserum; ELISA