本项目针对影响畜禽钙和磷利用效率的"消化"和"吸收"问题。首先,通过比较研究不同来源植酸酶蛋白结构、酶学特性、水解特性、对采食"玉米-杂粕"日粮黄羽肉鸡生长性能影响等,利用不同来源植酸酶之间的差异互补性、有效组合发挥协同增效作用,设计并筛选出最佳高效组合型植酸酶;然后,研究活性VD3、25-OH-VD3和1,25-(OH)2-D3对黄羽肉鸡生长性能、钙和磷真代谢率、血液和组织中活性VD3含量、钙结合蛋白和磷转运载体mRNA及蛋白表达的影响,阐明活性VD3提高钙和磷吸收效率的机理;最后,从生长性能、钙和磷真代谢率、血液中钙和磷含量、血液中活性VD3及激素水平、钙结合蛋白和磷转运载体的mRNA及蛋白表达等方面,系统研究组合型植酸酶与活性VD3之间互作效应及其作用机理。结果为高效利用饲料中钙和磷提供理论基础和实践指导。
Active Vitamin D3;Phytase;Calcium;Phosphorus;Availability
项目开展了3个部分研究(1)研究了4种来源植酸酶酶学性质的差异性与互补性,按1:9、2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:3、8:2和9:1的比例进行组合,通过分析不同组合对植酸钠和玉米-豆粕日粮中磷或钙代谢率影响,筛选出酶B+D 5:5、7:3二个较优组合;设计酶B+D 5:5、7:3个正效应组合和3:7一个负效应组合,研究组合相对单酶及空白对照组对肉鸡生长性能、胫骨品质及钙和磷沉积的影响,结果发现组合酶(酶BD=5:5或7:3)对肉鸡的采食量、日增重、胫骨钙含量、胫骨磷含量的改善效果优于添加单酶组(酶B和酶D)。(2)以普通VD3为对照,研究25-OH-D3和1ɑ-OH-D3对黄羽肉鸡生长性能、机体生化指标、骨骼发育及养分利用率等影响。结果发现90μg/kg 25-OH-D3(0.7% Ca、0.45% P)日粮设计可获得最佳生长性能;以25-OH-D3为VD3供给形式下,适宜添加量为90μg/kg;以1ɑ-OH-D3为VD3供给形式下,适宜添加剂量为10μg/kg。25-OH-D3和1α-OH-D3对VD3具有不同程度的积极替代效应。(3)设计25-OH-D3、植酸酶和NPP三因素、(34.5、69μg/kg)、(300、600U/k)、(0.2、0.3%)两水平的L8(27)正交试验,研究25-OH-D3、植酸酶和NPP交互作用对肉鸡生产性能、骨骼发育、钙和磷利用率及磷转运载体基因 mRNA表达的影响。结果发现NPP与植酸酶对肉小鸡日增重和采食量有显著互作效应;植酸酶与25-OH-D3,NPP与植酸酶,NPP、25-OH-D3与植酸酶对胫骨发育的影响存在交互作用;植酸酶、25-OH-D3和NPP对肉鸡血清钙、磷和AKP含量、胫骨灰分、钙和磷的利用率以及肉品质表观性状无明显的交互作用;21d肉鸡十二指肠 NaPi-Ⅱb mRNA 相对表达量显著高于空肠、空肠表达量显著高于回肠,低磷饲粮可以提高21d 肉鸡十二指肠、空肠和回肠NaPi-Ⅱb mRNA 表达量。项目初步建立了组合植酸酶设计的理论和实践技术基础,筛选出了2个较优组合,探讨了不同VD3对黄羽肉鸡生长、钙和磷利用效率影响及其机理,阐明了日粮钙和磷水平、植酸酶与VD3互作效应及其作用机理。发表论文8篇、其中SCI收录论文2篇,出版专著1部、编著2部,培养博士研究生1名、硕士研究生3名。