本研究通过对合浦珠母贝抗菌肽组织提取物制备方法,包括利用水产动物病原菌对合浦珠母贝进行刺激诱导、采用不同匀浆策略、应用加热和反复冻融等方法对合浦珠母贝的提取条件进行了优化,提高了合浦珠母贝粗提液的抗菌效果。利用层析技术对合浦珠母贝鳃组织粗提物进行分离和纯化,分离获得了1种抗菌蛋白,其分子量约为30kD;利用491制备型电泳槽从合浦珠母贝外套膜组织提取物中分离获得2个活性峰,其中活性峰II经SDS-PAGE凝胶电泳检测和蛋白酶处理,显示为分子量约1124Da的抗菌肽,其对水产动物病原菌无乳链球菌、哈氏弧菌和溶藻弧菌具有较好的杀菌和抑菌效果,最低抑菌浓度为0.52mg/ml;活性峰I经RT-HPLC分离纯化,获得多个抗菌活性组分,利用电喷雾四极杆飞行时间串联质谱测定了其分子量,并用Edman降解法对所获得的抗菌肽类物质进行N末端氨基酸序列分析,测定其氨基酸序列。
英文主题词Pincatda fucata Gould; antibacterial peptide;491 Prep Cell; antibacterial activity