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合浦珠母贝抗菌肽的分离纯化及其活性研究
  • 项目名称:合浦珠母贝抗菌肽的分离纯化及其活性研究
  • 项目类别:地区科学基金项目
  • 批准号:40866002
  • 申请代码:D0609
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2009-01-01-2011-12-31
  • 项目负责人:周永灿
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:海南大学
  • 批准年度:2008
中文摘要:

本研究通过对合浦珠母贝抗菌肽组织提取物制备方法,包括利用水产动物病原菌对合浦珠母贝进行刺激诱导、采用不同匀浆策略、应用加热和反复冻融等方法对合浦珠母贝的提取条件进行了优化,提高了合浦珠母贝粗提液的抗菌效果。利用层析技术对合浦珠母贝鳃组织粗提物进行分离和纯化,分离获得了1种抗菌蛋白,其分子量约为30kD;利用491制备型电泳槽从合浦珠母贝外套膜组织提取物中分离获得2个活性峰,其中活性峰II经SDS-PAGE凝胶电泳检测和蛋白酶处理,显示为分子量约1124Da的抗菌肽,其对水产动物病原菌无乳链球菌、哈氏弧菌和溶藻弧菌具有较好的杀菌和抑菌效果,最低抑菌浓度为0.52mg/ml;活性峰I经RT-HPLC分离纯化,获得多个抗菌活性组分,利用电喷雾四极杆飞行时间串联质谱测定了其分子量,并用Edman降解法对所获得的抗菌肽类物质进行N末端氨基酸序列分析,测定其氨基酸序列。

结论摘要:

英文主题词Pincatda fucata Gould; antibacterial peptide;491 Prep Cell; antibacterial activity


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