中文摘要：

人乳头瘤病毒（HPV）次要外壳蛋白L2诱发的保护性抗体水平低，交叉保护范围远不能满足我国HPV预防的要求。本项目首先筛选出HPV18、-58、-52、-33、-45、-31及-6型L2所含的多种保守中和抗体表位，与HPV16 L2的多种保守中和抗体表位联合应用，获得整合有上述8型L2多种表位的L2多肽抗原；同时通过N端融合两个通用型Th表位及删除其超变区的方法，获得CD4+T细胞刺激活性增强的改造鞭毛蛋白，以此为载体构建鞭毛-L2多肽融合基因，在大肠杆菌内表达纯化后进行活性检测，优选兼具诱发中和抗体滴度高且中和病毒型别多、体内保护范围广且稳定性好的鞭毛-L2多肽融合蛋白，再与其它种类的TLR刺激剂协同免疫，确定疫苗的最佳免疫方案，明确其免疫机制。该新型L2疫苗特色是将改造鞭毛蛋白的高效佐剂活性与多型L2多肽的广谱保护活性有机结合起来，具有免疫活性好、保护范围广及成本低的特点，尚未见有报道。

结论摘要：

人乳头瘤病毒（HPV）次要外壳蛋白L2诱发的保护性抗体水平低，交叉保护范围远不能满足我国HPV 预防的要求。本项目通过N端融合两个通用型Th表位及删除其超变区的方法获得3种改造鞭毛蛋白，并分别以此为载体构建各种鞭毛-HPV18 L2 aa.13-154多肽融合基因，在大肠杆菌内表达纯化后进行活性检测，结果表明删除鞭毛蛋白D3及D2超变区的FLIC△D2D3/18 L2N融合蛋白或删除鞭毛蛋白D3和CD2a超变区的FLIC△D3CD2a/18 L2N融合蛋白可有效诱发小鼠产生高滴度中和抗体及交叉中和抗体，且可保护免疫小鼠对抗同源及异源假病毒的攻击，而18 L2N蛋白单独免疫仅诱发低滴度的中和抗体和诱发针对HPV18的假病毒的免疫保护活性。研究结果表明鞭毛蛋白的突变体可作为分子内佐剂用于以L2为基础的广谱HPV疫苗的研究。