中文摘要：

烟草丛顶病由烟草丛顶病毒（TBTV）和烟草扭脉病毒（TVDV）复合侵染引起。TBTV在病害的症状发生和发展中起到了主要作用，明确TBTV各ORF编码蛋白的功能有助于探明TBTV的致病机理等。本项目构建了TBTV的全长cDNA侵染性克隆。分别获得了TBTV ORF3和ORF4的缺失突变体。对TBTV的ORF3和ORF4编码产物进行了原核表达，所表达的两个融合蛋白分子量约为30-35kDa。分别获得了ORF3和ORF4融合蛋白的多抗血清，建立了间接ELISA、Western blot等可对感病植株和传毒蚜虫进行大规模检测和专一性鉴定的技术。将TBTV的ORF3置换PVX的CP基因，构建了PVX-ORF3重组病毒载体，置换后的TBTV ORF3能在烟草植株中进行复制和表达，所表达的ORF3编码蛋白具有帮助病毒进行长距离运输的功能。构建了重组病毒载体pGR107-SORF3和pGR107-SORF4，可用于TBTV编码的基因沉默抑制子的研究。获得了TBTV云南4个分离物的全长基因组序列，进一步明确了TBTV与其他幽影病毒的亲缘关系。