以辐射致癌细胞模型为研究对象,采用蛋白组学的研究方法,即二维凝胶电泳及生物质谱技术,分析研究辐射致癌不同阶段的相关蛋白质的改变谱,选出在肿瘤的发生发展中可能起重要作用的部分蛋白质,并利用生物信息学的方法对这些蛋白质进行进一步的筛选和初步的功能预测,然后利用蛋白质芯片等技术对这些蛋白质进行较为深入的功能研究,寻找在辐射诱癌过程中起关键作用的蛋白质分子,揭示它们与辐射致癌的内在联系。深刻认识和揭示辐射致癌的分子机理,为肿瘤的早期诊断和治疗提供依据,并将对其他肿瘤发生学的研究产生深远的影响。
背景和目的辐射致癌发生及发展的机理尚不明确。本研究通过建立辐射致癌细胞模型,应用蛋白质组学技术观察辐射癌变细胞和正常细胞间的差异蛋白表达谱,以期获得辐射致癌相关蛋白。方法选取永生化人支气管上皮细胞株,利用γ射线诱导癌变,建立辐射致癌细胞模型。二维凝胶电泳技术筛选癌变和正常细胞间的差异表达蛋白点并进行质谱鉴定。利用实时荧光定量PCR和Western Blot技术对其中4个蛋白ENO1、Prx I、Dyrk2和GPX1在辐射致癌不同阶段的表达情况进行分析。结果在两组细胞间共得到可信差异蛋白点59个。通过质谱分析,共有26个蛋白点得到鉴定,主要包括一些参与细胞代谢、增值、分化的酶类、信号调控蛋白、DNA结合蛋白及一些细胞结构蛋白和少数功能不明的蛋白及肽段。其中ENO1和Prx I随辐射癌变的进展而升高,Dyrk2和GPX1随辐射癌变的进展而降低。结论应用二维电泳技术获得了辐射致癌差异表达蛋白谱,并分析了部分辐射致癌相关蛋白在辐射致癌不同阶段的表达情况。研究结果为阐明辐射致癌机制提供了理论依据。