中文摘要：

咀嚼肌疼痛是颞下颌关节紊乱病最常见的类型之一。随着口腔医学的发展，各种口腔治疗（咬合重建、冠桥修复、正畸、牙体充填）所致咬合变化相关的咀嚼肌疼痛发病增加。然而由于机制不清，面对患者承受的巨大痛苦，临床医生却束手无策。近年来，基于躯体疼痛的研究发现P2X3, TRPV1，ASIC3是参与肌肉疼痛的重要受体，受到学者们的广泛重视，然而这些受体在颌面部伤害性刺激传递中的作用尚未阐明。本研究在近临床的动物模型上，运用行为学和分子生物学手段，从组织水平上研究三叉神经节P2X3, TRPV1, ASIC3受体在慢性咀嚼肌疼痛中的表达和变化；从动物行为水平上分析受体拮抗剂对咀嚼肌机械痛敏的作用。对阐明慢性咀嚼肌疼痛相关机制具有重要意义，为探索临床治疗方法提供理论基础和依据。

结论摘要：

本课题组以往研究已经证实咬合干扰致大鼠咀嚼肌疼痛存在中枢机制，涉及中枢神经元敏化、胶质细胞活化以及相关激酶家族的激活。本研究主要在这一接近临床的咬合干扰致咀嚼肌疼痛动物模型上，运用行为学和分子生物学手段，研究外周咀嚼肌代谢产物的变化、探索三叉神经节中相关受体的表达和变化；从动物行为水平上分析受体拮抗剂对咀嚼肌机械痛敏的作用。深入讨论了咬合干扰致咀嚼肌疼痛的外周机制。本研究的主要结果1）咬合干扰可以导致大鼠咬肌相关能量代谢物质变化，包括肌酸，磷酸肌酸，ATP及其代谢平衡相关产物AMP、IMP；2）免疫荧光染色结果显示大鼠咬合干扰致咀嚼肌疼痛模型咬合干扰后三叉神经节P2X4、 TRPV1、ASIC3受体表达皆上调；3）实时定量PCR结果同时亦证明咬合干扰后3d、7d三叉神经节P2X4-mRNA, TRPV1-mRNA, ASIC3-mRNA表达上调，与相应受体蛋白水平表达一致；其中P2X4-mRNA上调最为显著；4）大鼠三叉神经节中肌肉传入神经元可表达P2X4、TRPV1、ASIC3受体，且咬合干扰后肌肉传入神经元受体表达上调（表现为表达受体神经元百分比增多）；5）咬肌内注射三种受体抑制剂（P2X4受体拮抗剂TNP-ATP,TRPV1受体拮抗剂AMG-9810，ASIC3受体拮抗剂APETx2），TNP-ATP、AMG-9810可以逆转咬合干扰引起的咀嚼肌机械痛敏，APETx2虽不能逆转机械痛敏但是与其他抑制剂存在协同作用。我们的主要结论是1）咬合干扰引起大鼠咀嚼肌机械痛敏的外周机制涉及咀嚼肌异常运动状态引起的代谢产物的变化，这是咬合干扰后咀嚼肌机械痛敏早期产生的物质基础，与我课题组前期推断结果一致；2）咬合干扰后外周咀嚼肌能量相关物质ATP受体P2X4在三叉神经节中表达上调，且咀嚼肌注射P2X4拮抗剂可以逆转咀嚼肌机械痛敏，说明外周ATP变化及其受体P2X4是参与咬合干扰致咀嚼肌疼痛外周机制的关键途径之一；3）咬合干扰后外周咀嚼肌代谢产物肌酸、磷酸肌酸所引起的H+浓度变化及相关受体TRPV1、ASIC3在三叉神经节中表达上调可能是参与咬合干扰致咀嚼肌疼痛外周机制的另一途径，其中可能涉及受体之间的协同作用。本研究结果对阐明慢性咀嚼肌疼痛相关外周机制具有重要意义，为探索早期临床治疗方法提供理论基础和依据。