中文摘要：

eNOS基因多态性影响eNOS的表达及生物学活性，损害微小血管的收缩与舒张反应性。本项目拟通过研究LPS对人原代脐静脉内皮细胞（HUVEC）eNOS mRNA 和蛋白质表达的影响以及与eNOS 894G→T或内含子4a/b VNTR基因多态性的关系；LPS对携带4a/b不同基因型HUVEC 27nt miRNA表达的影响以及27nt miRNA的表达对eNOS mRNA转录、稳定性以及蛋白质表达的影响；LPS 对eNOS 4a/b，894 G→T不同基因型单体HUVEC eNOS 27nt miRNA、eNOS mRNA与蛋白质表达的差异,以及与eNOS生物活性、细胞损伤以及脐动脉血管环收缩与舒张反应性的关系，证明上述两种eNOS基因多态性共同影响eNOS的表达与生物学活性，介导LPS刺激下微小血管收缩与舒张反应性改变以及血管内皮细胞损伤，是引起脓毒症组织灌流障碍的重要机制。

结论摘要：

组织灌注障碍是脓毒症发病机制的关键环节。本实验组严格按照国家自然科学基金项目计划进度及经费预算如期完成课题研究；在脂多糖（LPS）诱导下，采用传统RT-PCR方法、Western Blot法、ELISA法、“适配子-脂质体”mi RNA/si RNA转染等方法手段，对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）进行体外实验得出以下结论（1）证实eNOS 894G→T与内含子4a/b VNTR基因多态性共同影响eNOS的表达和生物学活性如调节炎性介质因子TNF-α、IL-6及血管内皮损伤标志物vWF、 VCAM-1的水平；（2）证明27nt miRNA影响HUVEC eNOS的表达及活性，影响炎性介质因子TNF-α、IL-6及血管内皮损伤标志物vWF、 VCAM-1的水平；（3）证明在脂多糖（LPS）刺激下，上述这种影响更加显著；（4）证实脓毒症过程中，由27nt miRNA 介导的eNOS 894G→T与内含子4a/b VNTR基因多态性共同作用下调eNOS表达，是引起组织灌注障碍的重要作用机制。这一机制的证明将为进一步设计以eNOS基因功能调节为目标的脓毒症组织灌注障碍的临床治疗提供新思路。