中文摘要：

当前，胰腺癌免疫治疗面临抗原特异性不强、体内的免疫治疗效果差的问题。胰腺癌的DNA疫苗具备同时诱导机体产生抗原特异的细胞免疫和体液免疫应答的能力，本课题通过体外模拟核酸疫苗激活人体免疫系统实验，筛选出具有最强免疫原性的胰腺癌特异性的MUC1-VNTRn核酸疫苗。并针对目前核酸疫苗抗肿瘤机制仍不明确、裸核酸疫苗在体内易被降解、外周组织中的抗原呈递细胞数量较少、易致机体产生免疫耐受等问题，本课题选择PAMAM树枝状高聚物作为已优化构建的MUC1-VNTRn核酸疫苗的载体，利用PAMAM安全性好、基因转移效率高及在直径上呈现出可被较好控制的单分散性特点，优化构建出能高效靶向淋巴结内DC细胞的纳米核酸疫苗，并研究其抗胰腺癌的机制。本研究构建的新型DC靶向的胰腺癌MUC1纳米核酸疫苗有望成为胰腺癌综合治疗的一个新的亮点,不仅适用于中晚期胰腺癌的治疗，而且适应于预防胰腺癌手术后的复发。

结论摘要：

DNA 疫苗是一种针对特异抗原产生有效细胞免疫和体液免疫的全新疫苗，胰腺癌的DNA 疫苗发展被寄予厚望。MUC1是黏蛋白家族中的一类，在90% 以上的胰腺癌中呈高表达且糖基化不完全，使得其胞外段VNTR暴露而成为许多肿瘤免疫治疗的新靶点。已有研究表明胰腺癌MUC1 胞外段VNTR 并非重复次数越多，其免疫原性越强；究竟多少重复数目的VNTR 才能诱导机体产生最强大的抗胰腺癌免疫应答，国内外已有的研究尚不能回答这些问题。本课题以MUC1作为胰腺癌基因治疗靶点的前期研究基础上，设计以MUC1-VNTRn作为胰腺癌免疫治疗的新靶点。通过构建MUC1-VNTRn核酸疫苗, 将MUC1-VNTRn体外转入DC，探讨致敏DC体外诱导的CTL，对人胰腺癌细胞株的特异性杀伤作用，再通过体内预防肿瘤生长和抗瘤效应，筛选出免疫原性较强的VNTRn核酸疫苗。目前本项课题已经按照设计思路，通过体内外实验筛选出pVAX1-MUC1-VNTR6 核酸疫苗具有更强杀伤效应，从而顺利回答了本课题提出的问题。我们通过小鼠体内保护性和治疗性免疫应答实验证实pVAX1-MUC1-VNTR6 核酸疫苗具有最强的免疫原性，其抑制panc02-MUC1 肿瘤生长能力要显著优于其他pVAX1-MUC1-VNTRn核酸疫苗。