中文摘要：

体外循环（cardiopulmonary bypass，CPB）术后肺损伤是临床上常见的并发症。目前认为，肺脏高温缺血是肺损伤发生的始动因素。随后，多种机制参与了发病过程。其中，肺源性肿瘤坏死因子（TNF-α）在CPB肺损伤中具有起动和触发作用，而细胞凋亡在CPB肺损伤中的作用及机制尚待明确。据此，我们提出保持肺脏低温、抑制肺源性TNF-α的释放来实现对CPB肺损伤的多层次"链锁式"保护。前期工作中，我们已经证实气管内给予抗TNF抗体可以减轻CPB肺损伤。本研究拟建立兔的体外循环模型，并通过肺动脉低温灌注抗TNF-α抗体，对围CPB期不同时点的肺功能、病理及血液学指标进行动态观察，验证保护效果，并从基因、蛋白水平探讨保护机制，进一步研究TNF-α相关细胞凋亡在CPB肺损伤的作用和信号传导途径，为使用抗凋亡药物进行CPB肺保护提供依据，从而有利于提高危重病人手术成功率，扩大手术适应症的范围。

结论摘要：

体外循环（Cardiopulmonary bypass，CPB）是心内直视手术的一种重要手段，CPB后肺损伤仍然是临床最为常见的并发症之一。CPB期间肺组织处于相对高代谢和高温缺血状态，显著增加炎症细胞在肺循环中的聚集、蛋白渗出和肺水肿等，此为肺损伤发生的始动因素。同时，血液与体外循环管道及氧合器接触可触发全身炎症反应，是引起CPB术后肺损伤的首要因素。而肺源性肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在该炎症反应中具有起动和触发作用。此外，近年研究发现，细胞凋亡可能在CPB肺损伤的病理过程中起着重要的作用，且TNF-α与细胞凋亡密切相关。据此，我们提出保持肺脏低温、抑制肺源性TNF-α的释放来实现对CPB肺损伤的多层次“链锁式”保护。本课题选取健康新西兰大白兔40只，随机均分为CPB+单纯肺动脉灌注液组、CPB+肺动脉灌注TNF-αAb组（主动脉阻断同时及30分钟后于肺动脉远端灌注TNF-αAb，总量27ng/kg）、单纯CPB组和单纯开胸组。测定各组围CPB期左、右心房血液中中性粒细胞计数、肿瘤坏死因子（TNF-α）、MDA含量及氧合指数；取肺组织样本，光镜观察其病理改变，电镜观察其超微结构。同时，动态观察肺组织含水量、TNF-αmRNA表达、细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Fasl的表达和Bcl-2/Bax及凋亡指数变化情况。结果证实TNF-αAb可明显抑制CPB期间中性粒细胞在肺内的聚集，抑制肺源性TNF-α的释放，减少脂质过氧化物的终产物MDA的产生，提高氧合指数。同时，TNF-αAb可降低肺含水量，减少肺组织细胞凋亡的发生， 降低肺泡上皮细胞Fasl、Bax蛋白表达，减缓Bcl-2蛋白表达下降，且TNF-αAb组肺组织病理形态学改变较轻。此外，低温肺动脉灌注方式给药可以降低肺内温度、减少肺循环炎症细胞聚集和氧自由基的产生并减轻细胞水肿，尤其可从转录水平降低肺组织TNF-α表达。因此，我们推断肺动脉灌注TNF-αAb能明显减轻体外循环引起的炎性肺损伤，并从内源性和外源性两条途径减轻肺组织细胞凋亡，进而达到肺保护目的，但CPB引发的TNF-α相关肺组织细胞凋亡的具体调控机制有待进一步研究。本项目研究成果共发表论文7篇，其中国内核心期刊文章5篇，SCI文章2篇，影响因子共5.7。