中文摘要：

本研究以牛脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因（A-FABP）为目标基因，利用腺病毒表达载体实现该基因在牛成肌细胞中的过量表达，检测在过量表达A-FABP基因后，牛成肌细胞形态学变化、细胞显微结构变化、细胞中甘油三酯含量变化，以及与脂类代谢相关和与肌肉和细胞骨架发育相关基因的表达水平变化等，用以确定A-FABP基因是否可诱导牛成肌细胞向脂肪细胞转分化。本研究从肉质改良的另外一个角度，不是增加肉中脂肪含量，而是探讨是否可以通过将肌细胞在一定程度上向脂肪细胞转分化，进而改善肌纤维致密坚韧的特性，以达到改善肉质的目的。本研究同时借鉴了转基因研究的思路，实验操作相对容易、试验周期和经费也相对缩小，研究结果可用于评估A-FABP基因在转基因育种研究中的应用价值，也为快速培育我国自主的优质肉牛品种提供了新的研究思路。

结论摘要：

本研究以牛A-FABP基因为目标基因，利用腺病毒表达载体实现了该基因在牛成肌细胞中的过量表达，初步阐明了该基因诱导牛成肌细胞向脂肪细胞转分化的潜在能力和作用机制，主要获得了以下研究结果1. 建立了成熟稳定的牛成肌细胞体外培养体系，有活力的成肌细胞能够在48 h内完全贴壁，变扁并向四周伸展而成为一梭形或纺锤形细胞，有折光性，约 3～4 d后进入对数生长期，6～7d因接触抑制生长速度减慢，为深入研究牛肉质性状分子调控机制奠定了基础；2.克隆了牛A-FABP基因全部CDS区，并成功构建了该基因的腺病毒超表达系统；3.利用该超表达系统，实现了A-FABP基因在牛成肌细胞中的过量表达；牛成肌细胞中过量表达A-FABP基因后，分别于第0、2、4、6、8天对细胞进行油红O染色，并提取细胞的总RNA检测相关基因的表达情况，结果发现培养至第2天时，Control组和Ad-NC处理组的细胞无脂滴出现；Ad-AFABP处理组细胞就开始出现能被油红O染色成橘红色的脂滴，说明该组成肌细胞向脂肪细胞方向转分化，随着培养时间的延长，细胞中脂滴不断变多。对相关基因的检测结果表明所检测的基因在正常细胞与Ad-NC处理组细胞中的表达量无显著差异 （P > 0.05）。C/EBPα、PPARγ、LPL、FAS和SCD基因在Ad-A-FABP处理组细胞中的表达量均显著高于其在Ad-N C处理组中的表达量（**P < 0.01），而SREBP-1c基因的表达量各组间未见明显差异。 本研究通过探索异位表达A-FABP基因于牛成肌细胞，检测其是否会向脂肪细胞转分化，研究结果可作为评估A-FABP基因在转基因育种中价值的重要指标。本研究结果显示，A-FABP基因可在一定程度上诱导牛成肌细胞向脂肪细胞转分化，这种转分化不能使肌细胞变成纯粹的脂肪细胞，只是在一定程度上使肌细胞向脂肪（样）细胞的方向转化，而不会影响肌细胞本身的功能，因此可尝试将该基因作为转基因育种中的候选基因进行更为深入的研究。 目前，课题已按照计划任务书完成了所有研究内容，目前已发表论文3篇，其中SCI收录2篇；已接收论文1篇；申请发明专利2项，获批1项，协助培养研究生5人，其中博士研究生2人，硕士研究生3人。本课题经费使用严格按照预算执行，经费支出情况符合项目任务目标，与有关财务制度相符，没有违规使用经费现象。