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人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1基因P7启动子调控的报告基因载体的构建及鉴定
  • ISSN号:1001-5515
  • 期刊名称:《生物医学工程学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病科,武汉430022
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30471921)
中文摘要:

应用PCR方法从人单核细胞系THP-1基因组DNA扩增人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferasel,ACAT1)基因P7启动子全长片段,进行TA克隆,经双酶切、测序鉴定阳性克隆。将该基因亚克隆至荧光素酶报告基因载体pGL3-Enhancer,用DEAE-葡聚糖(DEAE-dextm)法将重组质粒pGL3E-P7瞬时转染入单核细胞THP-1,检测其活性,证明pGL3E-P7能在体外表达荧光素酶。人ACAT1基因P7启动子调控的荧光素酶报告基因表达载体的成功构建,为研究动脉粥样硬化过程中ACAT1基因的转录调控机制提供新手段。

英文摘要:

The DNA segment of the human acyl coenzyme A: cholesterol acyltransferasel (ACAT1) gene P7 promoter was amplified by PCR from human monocytic leukemia cell line (THP-1) and cloned to TA vector, then the positive clone was confirmed by restriction enzymes and sequencing. The targeted segment was subcloned to Firefly luclferase report vector pOL3-Enhancer. The recombinant plasmid pGL3E-P7 was transfected transiently into THP-1, then the expression of luciferase could be detected in THP-1 by pGL3E-P7 transfection. We successfully constructed luciferase reporter vector containing P7 promoter of the human ACAT1 gene, and established a new means to study the transcriptional regulation mechanisms of ACAT1 during atherosclerosis.

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期刊信息
  • 《生物医学工程学杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:四川省科学技术协会
  • 主办单位:四川大学华西医院 四川省生物医学工程学会
  • 主编:石应康
  • 地址:四川省成都市外南国学巷37号华西医科大学附属第一医院
  • 邮编:610041
  • 邮箱:swyx@mcwcums.com
  • 电话:028-85501507 85422073
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-5515
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1258/R
  • 邮发代号:62-65
  • 获奖情况:
  • 中国生物医学核心期刊,四川省优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13208