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大肠杆菌BL21(DE3)中定向进化突变体库构建的方法比较
  • ISSN号：1674-2060
  • 期刊名称：生物技术世界
  • 时间：2013
  • 页码：68-70
  • 分类：Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构：[1]三峡大学医学院/分子生物学研究所, [2]中国科学院天津工业生物技术研究所
  • 相关基金：国家自然科学基金项目(No.31200036,No.31370089,No.21103098,No.91330113);天津市科技支撑计划重点项目(12ZCZDSY12700,11ZCZDSY08500)
  • 相关项目：以蛋白质相互作用为核心的生物振荡器的研究与设计
作者： 陈菲云|张大伟|刘森|
关键词： 酶, 定向进化, 克隆转化, 突变库, 多聚质粒
中文摘要：

定向进化的突变体库建立是定向进化是否成功的关键因素,只有建立足够大的库容才有可能筛选到合适的突变体。然而用来做定向进化的宿主菌的转化效率并不总是那么高,难以达到建库要求。而且在以常规分子克隆方法做连接转化时,耗时长,效率低等问题也影响了突变体库的建立,高效的克隆转化方法是定向进化所需求的。本文以大肠杆菌BL21(DE3)为转化宿主菌,挑选了一种新的高效的克隆转化方法,与现在实验室常规克隆转化方法进行了比较,证明了PCR多聚质粒的克隆转化方法在定向进化突变体库构建中的优势。为定向进化突变体库的构建提供了新的高效可靠的技术方法。

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期刊信息
  • 《生物技术世界》
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