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脱氧雪腐镰刀菌烯醇对BHK-21细胞的线粒体膜电位及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响
  • ISSN号:1000-2030
  • 期刊名称:南京农业大学学报
  • 时间:0
  • 页码:101-106
  • 分类:S852.43[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095
  • 相关基金:国家863计划项目(2007AA10Z429); 江苏省农业三项工程项目(SX(2010)268); 江苏省动物源食品与安全保障重点实验室项目(R201017); 国家自然科学基金项目(30901091)
  • 相关项目:NJA-1菌中DON降解酶的基因定位、克隆和特性研究
中文摘要:

采用戊二醛(GA)一步法将半抗原伏马菌素B1(FB1)分别与鸡卵清蛋白(OVA)、牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备2种具有免疫原性的FB1人工抗原FB1-OVA和FB1-BSA。分别采用凝胶电泳法、紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR)、基质辅助激光分析电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)4种方法鉴定人工抗原偶联效果并测定偶联比。将FB1-BSA作为免疫抗原免疫BALB/c小鼠,FB1-OVA作为固相包被抗原,采用间接酶联免疫吸附法(i-ELISA)测定小鼠抗血清滴度。结果表明:4种方法均鉴定FB1人工抗原合成成功。凝胶电泳法测定FB1-OVA和FB1-BSA相对分子质量分别约为50 000和75 000。MALDI-TOF-MS测定FB1-OVA和FB1-BSA相对分子质量分别为48 009.212和74 355.301,并精确计算FB1-OVA和FB1-BSA偶联比分别为5∶1和10∶1。FB1-BSA免疫后小鼠的抗血清效价为1∶1.25×105,并具有较高灵敏度。

英文摘要:

In the study,the hapten fumonisin B1(FB1)was coupled with carrier proteins ovalbumin(OVA)and bovine serum albumin(BSA)respectively,by one step method with glutaraldehyde(GA)method,and two artificial antigens FB1-OVA and FB1-BSA were synthesized.Four methods of gel electrophoresis,ultraviolet spectroscopy(UV),infrared spectroscopy(IR)and matrix-assisted laser absorption ionization time-of-flight mass spectrometry(MALDI-TOF-MS)were used to determine the coupled effects and coupling ratios of the artificial antigens.Then FB1-BSA was used to immunize BALB/c mice,and FB1-OVA was used as solid phase coating antigen.The indirect enzyme-linked immunosorbent assay(i-ELISA)was used to determine the titer of anti-serum from mice.The results showed that four methods all proved that carrier proteins coupled with FB1 successfully.The molecular weights of FB1-OVA and FB1-BSA were about 50 000 and 75 000 respectively by gel electrophoresis.The accurate molecular weights of FB1-OVA and FB1-BSA were 48 009.212 and 74 355.301 and the coupling ratios of FB1-OVA and FB1-BSA were 5∶1 and 10∶1 respectively by MALDI-TOF-MS.The titer of anti-serum was 1∶1.25×105 by i-ELISA with good sensitivity.

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期刊信息
  • 《南京农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:南京农业大学
  • 主编:郑小波
  • 地址:江苏省南京市卫岗1号
  • 邮编:210095
  • 邮箱:nauxb@njau.edu.cn
  • 电话:025-84395214
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2030
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1148/S
  • 邮发代号:28-53
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,全国优秀科技期刊,第二届江苏省十佳科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:22558