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中国地方猪种对世界养猪业的贡献、利用现状和展望
  • ISSN号:0529-5130
  • 期刊名称:《畜牧与兽医》
  • 时间:0
  • 分类:S852.4[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095
  • 相关基金:基金项目:农业部948项目(2012-Z22);教育部高等学校博士点基金项目(20110097110015);国家自然科学基金项目(30901091);中央高校基本科研业务费专项资金(0906J0397);江苏省农业三项工程项目(SX(2010)268)
中文摘要:

从伏马菌素B1(FB1)杂交瘤细胞株F3中扩增出‰和K基因片段,再经重叠延伸PCR(SOE—PCR)拼接扩增得到单链抗体(ScFv)基因,然后克隆到pCANTAB5E噬菌粒载体上,转化感受态大肠杆菌TGl,并经辅助噬菌体M13K07超感染,构建FB1毒素噬菌体单链抗体库,ScFv基因插入率为100%,库容约为1.5×10^7,噬菌体的滴度为2.1×10^15PFU·mL^-1。免疫亲和筛选和富集后,经ELISA法最终筛选得到5株可分泌阳性噬菌体抗体的细菌。结论:伏马菌素B1噬菌体单链抗体库构建成功。

英文摘要:

The VH and VL gene fragments were first amplified from hybridoma cell line( F3 )specific to fumonisin B1 (FBj)integrated as single-chain antibody( ScFv)gene using gene splicing by overlap extension PCR (SOE-PCR). The ScFv was cloned into a phagemid vector pCANTAB 5E, and then was transformed into Escherichia coli TG1 to establish a phage ScFv library with the helper phage M13K07. The results indicated that the insert rate of SvFv gene was 100% ,the phage antibody contained 1.5×10^7 independent clones and phage titer was 2.1 × 10^15 PFU· mL^-1. After biopanning enrichment and screening, five strains that could secrete the FB1 specific phage single-chain antibody were selected successfully. Conclusion :the phage ScFv library against FB~ was constructed successfully.

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期刊信息
  • 《畜牧与兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南京农业大学
  • 主编:石放雄
  • 地址:江苏省 南京市 卫岗1号南京农业大学内
  • 邮编:210095
  • 邮箱:muyizz@mnjau.edu.cn
  • 电话:025-84395701
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-5130
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1192/S
  • 邮发代号:28-42
  • 获奖情况:
  • 全国中文核心期刊,全国畜牧兽医期刊评比一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:17624