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用低形态学评分D3胚胎建立人胚胎干细胞系
  • ISSN号:0529-1356
  • 期刊名称:解剖学报
  • 时间:0
  • 页码:65-70
  • 语言:中文
  • 分类:R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科, [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心,武汉430030, [3]华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科,武汉430030
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30370505,30600188)
  • 相关项目:脊髓运动神经元发育相关microRNA的筛选及鉴定
中文摘要:

目的 寻找人胚胎干细胞(hESC)建系材料来源。方法 选用IVF低形态学评分的D3胚胎行序贯囊胚培养,用免疫外科的方法去除滋养细胞,将得到的内细胞团(ICM)接种于丝裂霉素C灭活的小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)上培养5~8d,每4~7d传代1次,分别取不同代的hESC进行碱性磷酸酶(AKP)染色、转录因子OCT-4、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)SSEA-4、SSEA-1、肿瘤排斥抗原(TRA)TRA-1-60、TAR-1-81、核型及体内外分化全能性鉴定。结果 130枚废弃的D3低形态学评分(评分〈16)的胚胎培养出囊胚19枚,获得原代克隆5个,成功培养出两株hESC系,它们具有hESC的共同的生物学特性。结论 部分低形态学评分的D3废弃胚胎可发育成囊胚。囊胚形成率与形态学评分相关,这些胚胎可作为建立hESC系的材料来源之一。

英文摘要:

Objective To find a new source to produce hESC lines. Methods D3 embryos with low morphological scores were cultured to blastocyst stage. Trophectoderm cells were separated from the ICMs by immunosurgery and isolated ICMs were cultured for 5-8 days on mitomycin-treated mouse embryonic fibroblasts (MEFs). Colonies derived from the ICMs were passed every 4-7 days and evaluated for cell surface markers including AKP, OCT-4, SSEA-4, SSEA-1, TRA-1-60, TRA-1-81, differentiation potentials and karyotypes. Results A total of 19 blastocysts were obtained from 130 embryos (quality score 〈 16) and blastulation rate was 14.62%. Immunosurgery resulted in the formation of 5 primary colonies, which produced 2 cell lines. Both cell lines satisfied the criteria that characterize pluripotent hESC. Conclusion A subset with poor quality D3 embryos judged on the basis of morphological assessment can form blastocysts. The blastulation rate is related to D3 scores and poor quality D3 embryos could be a new source for establishment of hES cell banks.

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期刊信息
  • 《解剖学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国解剖学会
  • 主编:章静波
  • 地址:北京海淀区学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100191
  • 邮箱:jpxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82802969
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-1356
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2228/R
  • 邮发代号:2-249
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科协优秀学术期刊三等奖,1997年第二届全国优秀科技期刊二等奖,97、98、99连续三年科技基础性和高科技期刊资助三等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:9672