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Marc-145细胞CD151蛋白主要抗原表位区的表达及其与猪繁殖与呼吸综合征病毒感染关系的研究
  • ISSN号:0366-6964
  • 期刊名称:畜牧兽医学报
  • 时间:2012.3.3
  • 页码:410-415
  • 分类:S852.659.2[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]山东农业大学动物医学院,泰安271018, [2]西北农林科技大学兽医免疫学研究所,西北农林科技大学动物医学院,杨凌712100
  • 相关基金:国家自然科学基金(30871857;U0931003/L01;30901063)
  • 相关项目:猪蓝耳病病毒感染和致病的分子机理
中文摘要:

为研究CD151与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的关系,根据GenBank中已发表的CD151蛋白的基因序列设计并合成一对特异性引物,从Marc-145细胞中扩增出294bp的CD151基因片段并克隆入pGEX4T-3载体,转化入大肠杆菌用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。表达蛋白纯化后用于免疫小鼠制备抗CD151蛋白血清,用ELISA和IFA检测抗血清的效价及特异性。将抗CD151蛋白血清与Marc-145细胞孵育后再感染PRRSV,观察细胞CPE验证该血清对PRRSV的阻断效果。结果表明成功构建了pGEX4T-3-CD151,获得了相对分子质量为37ku的重组CD151蛋白。制备的抗血清特异性结合Marc-145细胞并有效阻断PRRSV感染Marc-145细胞。这些研究结果为进一步阐明CD151与PRRSV感染的关系提供一定的理论基础。

英文摘要:

To study the role of CD151 in porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) infection, primers specific to CD151 were designed according to the similar gene se- quences submitted in GenBank. Total RNA was extracted from Marc 145 cell and a 294 bp of CD151 was amplified by RT-PCR. The target gene was cloned into pGEX4T 3 vector, then was transformed into E. coli and expressed with IPTG inducer. SDS-PAGE and Western blot were employed to identify the expressed protein. The protein was purified and used to immunize mice. The antiserum titres were determined by the ELISA and IFA, and were used to block PRRSV in- fection of Marc-145 cells. The results showed that CD151 gene was amplified and cloned into pGEX4T-3-CD151 vector. The recombinant CD151 protein with MW of 37 kDa was produced. The antiserum reacted specifically with the recombinant protein and blocked PRRSV infection of Marc-145 ceils. These results provide useful information for further understanding the role of CD151 in PRRSV infection.

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期刊信息
  • 《畜牧兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国畜牧兽医学会
  • 主编:文杰
  • 地址:北京海淀区圆明园西路2号中国农科院畜牧所
  • 邮编:100193
  • 邮箱:xmsyxb@263.net
  • 电话:010-62815987 62816996
  • 国际标准刊号:ISSN:0366-6964
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1985/S
  • 邮发代号:82-453
  • 获奖情况:
  • 1992年北京优秀期刊奖,1998年、2000年在全国畜牧兽医优秀期刊评比中获一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),瑞典开放获取期刊指南,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21857