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麦芽糖诱导软化芽孢杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶在枯草杆菌中的表达
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:《中国生物工程杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]江南大学食品科学与技术国家重点实验室,无锡214122, [2]江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,无锡214122
  • 相关基金:国家杰出青年基金(20625619); 科技部食品科学与技术国家重点实验室科研基金(SKLF-MB-200802); 中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP20917)资助项目
中文摘要:

通过PCR扩增软化芽孢杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶基因,将基因片段克隆到大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pGJ103中,转化枯草杆菌WB600得基因工程菌进行外源表达。在1.5%的麦芽糖初始发酵培养基上摇瓶培养,48 h后重组枯草杆菌产酶活性为6.1U/ml。通过单因素分析和响应面分析对重组枯草杆菌产CGT酶摇瓶发酵条件进行优化。分析得到培养基关键组分麦芽糖,玉米淀粉和酵母粉三者最佳浓度分别为:15.5g/L,13g/L和20g/L。在此条件下,摇瓶培养36h后α-CGT酶活性为17.6U/m l,5L罐分批发酵30h后酶活达到20U/ml(水解活性为1.4×104IU/ml)。

英文摘要:

The α-cgt gene was obtained from Paenibacillus macerans by PCR,and then it was cloned into Escherichia coli-Bacillus subtilis shuttle vector pGJ103 and transformed into B.subtilis WB600.After cultivation for 48 h with shake flask in 1.5% maltose initial medium,the α-CGTase activity of recombinant B.subtilis was 6.1U/ml.In addition,the experiment optimized the culture conditions of the recombinant B.subtilis strain in shaking flask by means of a single factor synthesis and Box-Behnken design(BBD).The analysis predicted the concentrations of maltose,corn starch and yeast extract were at 15 g/L,13 g/L,and 20 g/L,respectively.In this condition,the experimental result of 17.6 U/ml could be obtained when the cells were cultured for 36 h in shaking flasks.The CGTase activity reached 20 U/ml at 30 h of culture in a 5 L bioreactor(hydrolysis activity was 1.4×104 IU/ml).

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959