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Comparison of the unlabeled and labeled pre-mRNA splicing assays in vitro
  • ISSN号:1672-4666
  • 期刊名称:《中华微生物学和免疫学:英文版》
  • 时间:0
  • 分类:Q7[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]天津医科大学免疫学教研室,天津300070, [2]天津医科大学总医院
  • 相关基金:国家自然科学基金(30670441,30300070),天津市科委应用基础研究重点项目(07JCZDJC07300),国家教育部新世纪人才支持计划(NCET-04-0245),高等学校博士学科点专项基金(20040062003)
中文摘要:

目的:分别构建含有人类p100蛋白SN片段和TD片段基因的真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C2-p100-SN和pEGFP-C2-p100-TD。方法:利用EcoRI和BamHI限制性内切酶对已构建好的质粒PSG5-p100-SN和PSG5-p100-TD进行双酶切以获得目的片段p100-SN和p100-TD基因片段,回收纯化后连接到质粒pEGFP-C2上。结果:通过对重组质粒进行菌落PCR鉴定以及酶切鉴定均能从PCR产物和酶切产物中观察到p100-SN和p100-TD片段。结论:成功构建了可以在真核细胞内表达绿色荧光蛋白和目的蛋白的融合蛋白的重组质粒pEGFP-C2-p100-SN和pEGFP-C2-p100-TD,可为有关人类p100蛋白功能及作用机制研究奠定基础。

英文摘要:

Objective: To construct eukaryotic green fluorescence protein expressing recombinant plasmids, pEGFP-C2-p100-SN and pEGFP -C2-p100-TD, which contained human p100 Staphylococcal Nuclease (SN) domain and Tudor (TD) domain respectively. Methods: The p100-SN and p100-TD fragments were purified after PSG5-p100-SN and PSG5-p100-TD were digested by Eco RI and Barn HI. And then they were inserted into pEGFP-C2 fluorescent expressing vector respectively. Results: The fragments of p100-SN and p100-TD were detected in the products of the restriction enzyme digestion and PCR. Conclusion: The fluorescent expressing recombinant plasmids, which expressed p100-SN-GFP and p100- TD-GFP fusion proteins, are constructed successfully. The studies about the function of human p100 pro- tein are put forward.

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期刊信息
  • 《中华微生物学和免疫学:英文版》
  • 主管单位:
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:曾毅
  • 地址:北京朝阳区三间房南里4号
  • 邮编:100024
  • 邮箱:cjmie@163.com
  • 电话:010-65756595
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-4666
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4986/R
  • 邮发代号:
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  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:6