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pBIN438-CMV△Rep表达载体的构建及其在根癌农杆菌中的转化
  • ISSN号:2095-4441
  • 期刊名称:《广西中医药大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S188[农业科学—农业基础科学]
  • 作者机构:[1]武汉生物工程学院科技处,湖北武汉430415
  • 相关基金:湖北省教育厅资助项目(B20129002);武汉市教育局科研资助项目(2010087)
中文摘要:

用PCR方法扩增黄瓜花叶病毒部分复制酶基因(CMV△Rep),连接到PUCm-T载体上构建成克隆载体PUCm-T-CMV△Rep。用BamHⅠ和SalⅠ分别对克隆载体PUCm-T-CMV△Rep和植物表达载体pBIN438进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4 DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体pBIN438-CMV△Rep。采用CaCl2冻融法将重组子导入根癌农杆菌LBA4404。经PCR和双酶切鉴定,表明重组质粒pBIN438-CMV△Rep已成功导入根癌农杆菌中。

英文摘要:

Cucumber mosaic virus partial replicase gene were amplified by PCR(CMV Rep),connected to the PUCm-T vector to construct the cloning vector of PUCm-T-CMV Rep. With BamH I and Sal I of PUCm-T-CMV cloning vector Rep and the plant expression vector pBIN438 were digested,obtained fragment and linear plas?mid. Directional connection in T4 DNA ligase,a plant expression vector was constructed by pBIN438-CMV Rep. Using CaCl2 freeze-thaw method the recombinant plasmid into Agrobacterium LBA4404. By PCR and double enzyme diges?tion showed that the recombinant plasmid,pBIN438-CMV Rep has been successfully introduced into Agrobacteri?um tumefaciens.

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期刊信息
  • 《广西中医药大学学报》
  • 主管单位:广西中医药大学
  • 主办单位:广西中医药大学
  • 主编:唐农
  • 地址:广西南宁市明秀东路179号
  • 邮编:530001
  • 邮箱:gszb@chinajournal.net.cn
  • 电话:0771-3137545
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-4441
  • 国内统一刊号:ISSN:45-1391/R
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 广西高校优秀学报,<>执行优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:1912