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基于毛细管液滴技术的血液乙型肝炎病毒DNA提取
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:TQ021.1[化学工程]
  • 作者机构:[1]广州医学院附属广州市第一人民医院检验科临床化学技术研究室,广州510180
  • 相关基金:“十一五”重大专项(No.2008ZX10004-004); 国家自然科学基金(No.30870753); 广州市医药卫生科技重点项目(No.2009-ZDi-21)资助
中文摘要:

基于毛细管液滴技术,建立了提取血液中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的方法。方法的基本原理是向聚四氟乙烯毛细管中连续引入油相和水相溶液时,由于表面张力作用,可以形成稳定的油包水型液滴。依次引入含有不同试样的液滴,在毛细管中完成进样、DNA结合、洗涤以及洗脱等过程。实验表明,采用蛋白酶K裂解和提高洗脱温度有利于提高DNA回收率。优化后的血清HBV DNA提取操作在25 min内完成,回收率大于60%。本方法的DNA提取量与常规方法相当,而相对标准偏差较大(23.3%vs 12.9%)。本方法具有简单、快速和低成本的优势,有望成为一种微全核酸分析系统样品前处理的有效解决方案。

英文摘要:

A novel in-capillary droplet-based DNA extraction method was developed,using the principle of water-in-oil droplet formation in the highly hydrophobic polytetrafluoroethylene capillary.By sequentially introducing droplets containing sample or reagents,all the steps related to blood hepatitis B virus(HBV) DNA extraction,including sample injection,DNA binding,magnetic beads rinsing and DNA elution were continuously implemented in the capillary.Experimental results showed that proteinase K lysis and elevated elution temperature facilitated higher extraction efficiency.With optimized conditions,an extraction was completed in 25 min with microliter level sample/reagent consumption.The droplet-based method achieved an extraction efficiency of ~60% that is comparable to that of a commercial method.However,the RSD of extraction efficiency was relatively higher.In summary,the droplet-based DNA extraction developed is simple,fast and low-cost.It has the potential to be integrated into a micro-total nucleic acid analysis system.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455