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溴苯腈单克隆抗体的制备纯化与性能考察
  • ISSN号:1672-2043
  • 期刊名称:《农业环境科学学报》
  • 时间:0
  • 分类:X830.2[环境科学与工程—环境工程]
  • 作者机构:[1]上海交通大学农业环境生态研究所,上海201101
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(20337010);国家基础研究重大项目(2004CB418503);上海市基础研究重点项目(04JC14051)
中文摘要:

以人工合成溴苯腈免疫原免疫BALB/CF1小鼠,采用杂交瘤技术制备了3株能稳定分泌抗溴苯腈单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用培养扩增后的各建株细胞诱导小鼠生长腹水,腹水效价达10^-6-10^-7。琼脂双扩试验表明,各单抗蛋白均为IgG,抗体蛋白1086为IgGl亚类蛋白,3D6和8H2均为IgG2a型亚类蛋白。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体腹水,对纯化的单抗进一步做交叉反应试验,与其他苯腈类农药交叉反应率低于10%,结果表明该单抗有较好的特异性,可用于对溴苯腈的酶联免疫检测.线性检测范围为10-1000μg·kg^-1,溴苯腈检测限为10μg·kg^-1。

英文摘要:

Three hybridoma cell lines secreting anti- bromoxynil McAbs were obtained by immunization of BALB/C F1 mice with the conjugates of bromoxynil immunogen, hybridoma technique and McAbs. 10B6 anti-bromoxynil McAb was categorized into IgG1 subtypes. 3D6 and 8H2 anti- bromoxynil McAb were categorized into IgG2a subtypes. These hybridomas were prepared ascites of the mice, and the titers of the McAbs in the ascites ranged from 10^-6 to 10^-7. McAbs in the ascites were purified by caprylic acid ammonium sulphate precipitation method. The analysis experiment of bromoxynil showed that the cross reactivity were below 10% respectively. So McAbs were therefore considered interesting for developing a bromoxynil -specific ELISA. The quantitative working range of the ELISA was from 10μg·kg^-1 to 1 000μg·kg^-1 with a LOD of 10μg·kg^-1.

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期刊信息
  • 《农业环境科学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:农业部环境保护科研监测所 中国农业生态环境保护协会
  • 主编:李文华
  • 地址:天津市南开区复康路31号
  • 邮编:300191
  • 邮箱:caep@vip.163.com
  • 电话:022-23674336 23006209
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-2043
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1347/S
  • 邮发代号:6-64
  • 获奖情况:
  • 全国中文核心期刊,列于被引频比最高的中国科技期刊500名之内
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:34877