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转天山雪莲sikPIP_3基因烟草的获得及抗逆性鉴定
  • ISSN号:1000-4025
  • 期刊名称:《西北植物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q789[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室,新疆石河子832003
  • 相关基金:国家转基因专项(2011ZX005-004); 国家自然科学基金(30960034,31160049)
中文摘要:

利用PCR技术从实验室建立的天山雪莲DNA文库中克隆了天山雪莲质膜水孔蛋白基因sikPIP3,构建了植物表达载体pBI121-sikPIP3,通过农杆菌介导法转化烟草品种NC89,经PCR和RT-PCR检测证明目的基因成功导入并得到了表达,采用水分胁迫进行抗旱分析和采用冷冻胁迫进行抗寒性分析。结果显示:(1)克隆出具有水孔蛋白基因特性的sikPIP3基因。(2)经断水干旱处理,转基因烟草的生长表型优于野生型烟草,特别是在断水9d的情况下,野生型烟草已经完全萎蔫,转基因烟草萎蔫症状较轻;生理指标测量结果显示,转基因烟草的相对电导率和MDA的含量低于野生型烟草,相对含水量和CAT活性高于野生型烟草。试验表明转sikPIP3烟草的抗旱性高于野生型烟草。(3)经不同温度胁迫处理,转基因烟草的生长表型优于野生型烟草,特别是在-4℃冷处理6h情况下,野生型烟草已经完全萎蔫,转基因烟草只出现少量伤斑;生理指标分析结果表明,转基因烟草的相对电导率和MDA的含量低于野生型烟草,CAT活性高于野生型烟草。试验表明转sikPIP3烟草的抗寒性高于野生型烟草。综合结果表明:sikPIP3基因在抗逆基因工程方面具有较高的应用前景。

英文摘要:

Saussurea involucrata plasma membrane aquaporin protein gene sikPIP3 was cloned from S.involucrata DNA library which was prepared in laboratory by PCR technique.Then a plant expression vector pBI121-sikPIP3 was constructed using sikPIP3 gene.The transgenic tobacco was further obtained through Agrobacterium tumefaciens transformation of tobacco NC89.PCR and RT-PCR analysis indicated that the plasma membrane aquaporin protein gene sikPIP3 had been integrated into the genome.Water stress method was introduced to analyze drought resistance and freezing stress method was used to analyze cold resistance.The results showed that:(1)Plasma membrane aquaporin protein gene sikPIP3 was cloned;(2)Growth phenotype of transgenic tobacco is better than that of wild-type after drought treatment,especially under the circumstances without water for 9 days.The wild-type tobacco is wilting completely,and transgenic ones presented mild wilting symptoms;Physiological index analysis results showed that relative conductivity and MDA content of transgenic tobacco is lower than that of wild-type,but relative water content is higher.The drought resistance of sikPIP3 transgenic tobacco is better than that of wild-type.(3)Growth phenotype of transgenic tobacco is better than that of wild-type after stress treatment with different temperatures,specially under the condition of-4℃ cold treatment for 6 h.The wild-type was wilting completely,however the transgenic-type only emerged little injure spot.Physiological index analysis results showed that relative conductivity and MDA content of genetic tobacco is lower than that of wild-type.The cold resistance of sikPIP3 transgenic tobacco is better than that of wild-type.Comprehensive results indicated that sikPIP3 gene has nice applications in resistance genetic engineering.

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期刊信息
  • 《西北植物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:西北农林科技大学 陕西省植物学会
  • 主编:赵忠
  • 地址:陕西杨陵邰城路3号西北农林科技大学
  • 邮编:712100
  • 邮箱:xbzwxb@vip.163.com
  • 电话:029-87082936
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-4025
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1091/Q
  • 邮发代号:52-73
  • 获奖情况:
  • 全国优秀期刊,中国自然科学核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:46104