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鸡Mx蛋白基因诱变修饰及抗病活性
  • ISSN号:0001-6209
  • 期刊名称:《微生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:S85[农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]扬州大学动物科学与技术学院,扬州225009, [2]苏州大学医学院基础医学系,苏州215006, [3]江苏省农业科学院畜牧研究所,南京210014
  • 相关基金:国家自然科学基金(30671509);高等学校博士学科点专项科研基金(20061117004)
中文摘要:

【目的】进一步研究鸡Mx蛋白第631位氨基酸的变异与鸡群抗病性的相关性。【方法】本实验利用PCR突变技术将鸡Mx蛋白基因的全长cDNA第2032位的碱基由G突变为A(既631位氨基酸的改变),并将突变的Mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,重组表达载体转染COS-Ⅰ细胞后,进行RT-PCR与间接免疫荧光(IFA)鉴定。【结果】对鸡Mx蛋白基因的cDNA进行PCR诱变修饰正确,构建了能够正确表达鸡Mx蛋白的重组真核表达载体;诱变修饰重组Mx蛋白对抗新城疫病毒(NDV)感染分析结果显示,重组Mx蛋白具有较强的抗新城疫病毒生物活性。【结论】为下一步研究鸡Mx蛋白的抗病机理与制备抗病转基因鸡奠定了坚实的基础。

英文摘要:

[Objective] To study whether the antiviral specificity of chicken Mx protein is determined by an amino acid substitution at position 631. [Methods] We used PCR site-directed mutagenesis technique by which a single amino acid was reciprocally substituted G with A at position 2032bp of chicken Mx cDNA. Sequence analysis confirmed successful mutation from G to A at 2032bp of chicken Mx cDNA, The fragments amplified by PCR containing the mutation site were subcloned into a enteukaryotic expression vector. Then the recombinant vector was transfected into COS- Ⅰ cell, Mx gene and Mx protein in the transfected COS- Ⅰ cell were detected by RT-PCR and indirect fluorescence assay. [Results] The results showed that COS- Ⅰ cell transfected the recombinant plasmid could stably express the Mx protein. The antivirus assay showed that Mx protein had characteristics of resistance to infection of Newcastle Disease Virus. [Condusion] This study may provide a basis of the virus-resistant mechanism of Mx protein and production of virus-resistant transgenic chicken.

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期刊信息
  • 《微生物学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国微生物学会 中国科学院微生物研究所
  • 主编:谭华荣
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路3号中国科学院微生物研究所B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:actamicro@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807516
  • 国际标准刊号:ISSN:0001-6209
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1995/Q
  • 邮发代号:2-504
  • 获奖情况:
  • 国家优秀期刊二等奖,中科院优秀期刊二等奖,中国科协首届优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21879