位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
传染性法氏囊病病毒VP4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
  • ISSN号:1000-3061
  • 期刊名称:《生物工程学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.659.4[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京100193
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.31272543); 现代农业产业技术体系建设专项资金(No.NYCYTX-41)资助
中文摘要:

传染性法氏囊病病毒(IBDV)蛋白VP4在抑制宿主免疫应答中起重要作用,为制备IBDV VP4的单克隆抗体,以实验室保存的融合蛋白His-VP4免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合、筛选、亚克隆后获得4株能稳定分泌抗VP4的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为3B3、3H11、4C8和4G6,经间接ELISA测定4株单抗的亲和力解离常数分别为4.61×10^–11、1.71×10^–10、4.26×10^–11和5.02×10^–11,均为高亲和力抗体。4株单抗的重链类型分别为Ig G1、Ig G1、Ig G2b和Ig G1。进一步以Western blotting鉴定,该4株单抗均能特异地识别IBDV的VP4蛋白,间接免疫荧光和Western blotting试验表明4株单抗均能识别IBDV感染DF-1细胞后产生的VP4蛋白。该单抗为检测IBDV以及研究IBDV VP4的生物学作用奠定了基础。

英文摘要:

Infectious bursal disease virus(IBDV) VP4 plays an important role in immunosuppression of host. In order to develop monoclonal antibodies(Mc Abs) against VP4, we vaccinated BALB/c mice with His-VP4, screened and subclonedpositive clones. We established 4 hybridoma cell lines that stably secreted McAbs against VP4 and named these cell lines 3B3, 3H11, 4C8 and 4G6, respectively. We tested the dissociation constant(Kd) of these McAbs, and found that their Kds were 4.61×10^–11, 1.71×10^–10, 4.26×10^–11, 5.02×10^–11, respectively. The isotypes of these McAbs were determined to be IgG1, IgG1, IgG2 b and IgG1. These McAbs specifically bound to VP4 in IBDV infected DF-1 cells as demonstrated by Western blotting analysis and fluorescence antibody assay. These McAbs would help to detect IBDV infection and to analyze the biological activities of IBDV VP4.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《生物工程学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:杨胜利
  • 地址:北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:cjb@im.ac.cn
  • 电话:010-64807509
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3061
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1998/Q
  • 邮发代号:82-13
  • 获奖情况:
  • 北京市优秀科技期刊期刊奖,中国科协首届优秀学术期刊奖,2000年中科院优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18441