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传染性囊病病毒(IBDV)VP3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
  • ISSN号:0529-6005
  • 期刊名称:《中国兽医杂志》
  • 时间:0
  • 分类:S852.4[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193
  • 相关基金:国家自然科学基金(31430085;31272543); 现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-41)
中文摘要:

为制备抗IBDV VP3蛋白的单克隆抗体,以VP3-His蛋白免疫BALB/c小鼠,经4次免疫、融合、亚克隆,筛选出1株能够稳定分泌抗VP3蛋白单克隆抗体的细胞株,命名为4H8F7C10。经间接ELISA方法检测,小鼠的腹水效价为2.05×106,单克隆抗体的解离常数(k D)为9.67×10-8,此株抗体亚类为Ig G3。通过Western Blot和间接免疫荧光试验检测,该株单克隆抗体可以识别IBDV感染DF-1细胞产生的VP3蛋白。初步确定此株单克隆抗体的抗原识别区位于VP3蛋白N端的第50-90位氨基酸。此株单克隆抗体的制备为IBDV临床检测方法的建立以及致病分子机制的研究奠定了基础。

英文摘要:

To develop antibodies against IBDV VP3,BALB/c mice were vaccinated with VP3-His.After four times immunization,fusion,and subcloning,a hybridoma cell clone that stably secreted Mc Abs against VP3 was obtained and named 4H8F7C10.Antibody titers were 2.05×106as examined by indirect ELISA in ascite fluid of mice inoculated intraperitoneally with monoclonal antibody-producing hybridoma cells.The dissociation constant(k D)of the monoclonal antibody was determined to be 9.67×10-8and the isotype was Ig G3.The Mc Ab specifically bound to VP3 in IBDV-infected DF-1 cells was validated by Western Blot and indirect Fluorescence Antibody assay.The epitope in VP3 that was recognized by 4H8F7C10 was located between 50 to 90 aa as demonstrated by Western Blot.The Mc Ab will be useful for the examination of IBDV antigen and to elucidate the molecular mechanism of IBDV infection.

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期刊信息
  • 《中国兽医杂志》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国畜牧兽医学会
  • 主编:张克家
  • 地址:北京市海淀区圆明园西路2号
  • 邮编:100193
  • 邮箱:vetzzhi@cau.edu.cn
  • 电话:010-62733040
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-6005
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2471/S
  • 邮发代号:2-137
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:19671