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果蝇Mef2基因多克隆抗体的制备及检测
  • ISSN号:1000-2537
  • 期刊名称:《湖南师范大学自然科学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R392.11[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,中国长沙410081
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30930054)
中文摘要:

为了在果蝇模型中进一步研究Mef2基因的功能,制备了Mef2多克隆抗体.以果蝇eDNA文库为模板,PCR扩增出亲水性和特异性均好的果蝇Mef2基因片段,将其克隆入pET-28a原核表达载体,然后将重组质粒转化人大肠杆菌菌株Rossetea,用IPTG诱导表达融合蛋白.融合蛋白先经Ni-IDA凝胶柱纯化,再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,然后用不同浓度的抗体分别进行Western-blot实验检测抗体效价.所得结果显示获得了较高效价的果蝇Mef2多克隆抗体..

英文摘要:

In order to study the further function of Mef2 gene in Drosophila model, it is necessary to prepare its polyclonal antibody. The cDNA fragment of part coding sequence of Mef2 was obtained by PCR amplification, then it was cloned int6 the expression vector pET-28a. The recombinant expression plasmid was transformed into Rosseta and induced by IPTG to acquire fusion protein. The purity protein obtained by treating the lysates with Ni- IDA gel column purification, then it was immuned into the New Zealand white rabbit. The antibody's fiter and specification was identified by Western blot separately, and all the results show that high sensitivity and specificity anti- Mef2 polyclonaI antibody was generated.

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期刊信息
  • 《湖南师范大学自然科学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:湖南师范大学
  • 主办单位:湖南师范大学
  • 主编:杨春明
  • 地址:湖南长沙岳麓山湖南师范大学期刊社
  • 邮编:410081
  • 邮箱:xbz@hunnu.edu.cn
  • 电话:0731-8872473
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2537
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1065/N
  • 邮发代号:42-96
  • 获奖情况:
  • 全国优秀科技期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:4771