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果蝇血液发育标记基因mrj的多克隆抗体制备及检测
  • ISSN号:1000-2537
  • 期刊名称:《湖南师范大学自然科学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,中国长沙410081
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30671053,30871340,30930054)
中文摘要:

珂是黑腹果蝇中一个蛋白编码基因.根据已报道的m巧基因序列,利用生物信息学分析选取果蝇唧基因抗原亲水区,通过PCR扩增出其部分编码区序列,将其连接到pET-28a原核表达载体上.经酶切及测序鉴定质粒构建成功后,将重组质粒(pET-28a-mrj)转入Rosetta菌后通过IPTG(Isopropylβ—D—thiogalactoside)诱导表达出带His标签的重组融合蛋白后用镍柱纯化.将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用WesternBlot检测抗体的效价和特异性.

英文摘要:

Mrj is a protein coding gene from Drosophila. Hydrophilic and well specific fragment of mrj is selected by bioinformatics method. Then it was amplified the fragment by PCR and cloned into the expression vector pET-28a to acquire the recombinant expression plasmid pET-28a-mrj. It was transformed into Escherichia coli Rosetta, and the fusion protein with His tag was induced with IPTG. The fusion protein was purified by nickel chelating resin. His-mrj fusion protein was used to immune the New Zealand white rabbits, then identified the antibody by Western blot.

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期刊信息
  • 《湖南师范大学自然科学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:湖南师范大学
  • 主办单位:湖南师范大学
  • 主编:杨春明
  • 地址:湖南长沙岳麓山湖南师范大学期刊社
  • 邮编:410081
  • 邮箱:xbz@hunnu.edu.cn
  • 电话:0731-8872473
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2537
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1065/N
  • 邮发代号:42-96
  • 获奖情况:
  • 全国优秀科技期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:4771