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斑马鱼心脏发育候选基因Pygo1多克隆抗体的制备及检测
  • ISSN号:1007-7847
  • 期刊名称:《生命科学研究》
  • 时间:0
  • 分类:Q71[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,中国湖南长沙410081
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30930054)
中文摘要:

Pygo1是心脏发育候选基因,可能在斑马鱼心脏发育过程中起着重要的调控作用.利用生物信息学选择斑马鱼Pygo1基因抗原亲水区,将扩增出的PCR片段克隆到原核表达pGEMT-4T-1载体中,转入E.coli中后通过IPTG(Isopropyl β-D—thiogalactoside)分别诱导表达GST融合蛋白.蛋白经纯化分离后用于免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用Western Blot检测抗体的效价和特异性.

英文摘要:

Pygol is a candidate gene for heart development, which might play an important role in Zebrafish heart development. Hydrophilic antigen region of Pygol is selected by bioinformatic method. Pygol fragment was amplified by PCR and purified. The fragment was inserted into the prokaryotic expression vector pGEMT-4T-1. This new recombined plasmid was transformed into E. coli and expression of the GST fusion protein was induced with IPTG. After purified by GST affinity chromatography, GST-Pygol fusion protein was used to immune the New Zealand white rabbits to prepare polyclonal antibody. The antibody titer and specificity was identified by Western blot.

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期刊信息
  • 《生命科学研究》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:湖南师范大学
  • 主办单位:湖南师范大学
  • 主编:梁宋平
  • 地址:长沙湖南师范大学生命科学学院1号档127#
  • 邮编:410081
  • 邮箱:life@hunnu.edu.cn
  • 电话:0731-8872616
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7847
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1266/Q
  • 邮发代号:42-172
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版)
  • 被引量:5334