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人TRAIL基因原核表达载体的构建及鉴定
  • ISSN号:1673-6273
  • 期刊名称:《现代生物医学进展》
  • 时间:0
  • 分类:Q75[生物学—分子生物学] Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]徐州医学院病原生物与免疫学教研室,江苏徐州221004, [2]徐州市中心医院泌尿外科,江苏徐州221009
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30973443); 徐州市科技计划项目(XM08C055)
中文摘要:

目的:克隆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因片段(114~281氨基酸残基)并构建原核表达载体。方法:取健康人外周血提取总RNA,设计合成引物并引入EcoR I和Xho I酶切位点,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。结果:从外周血cDNA中扩增出501 bp的目的片段,测序结果证实成功构建重组质粒pGEX-6P-1/TRAIL。结论:成功构建TRAIL基因的原核表达载体pGEX-6P-1/TRAIL,为肿瘤细胞的凋亡研究提供理论依据。

英文摘要:

Objective:To clone and construct the prokaryotic expression vector of the TNF-related apoptosis inducing ligand gene(amino acids 114~281).Methods:RNA was extracted from the peripheral blood of health adult.A pair of primers with restriction site EcoR I/Xho I was designed.The extracellular domain region of TRAIL gene was amplified by RT-PCR and then cloned into the prokary-otic expression vector pGEX-6P-1.The recombinants were confirmed by EcoR I/Xho I digestion,PCR,and DNA sequencing.Result:The extracellular domain region with a molecular size of 501 bp of TRAIL gene was amplified successfully.DNA sequencing showed that the recombinant plasmid was successfully constructed.Conclusion:A prokaryotic expression vector pGEX-6P-1/TRAIL was con-structed successfully,which provides theory for tumor apoptosis research.

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期刊信息
  • 《现代生物医学进展》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:黑龙江省卫生厅
  • 主办单位:黑龙江省红十字医院 黑黑龙江省红十字医院 黑龙江省森林工总医院
  • 主编:申宝忠
  • 地址:哈尔滨市南岗区花园街184号403
  • 邮编:150001
  • 邮箱:biomed_54@126.com
  • 电话:0451-82583800 53658268
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-6273
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1544/R
  • 邮发代号:14-12
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:33230