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耐热β-淀粉酶高产菌株的筛选及其产酶条件优化
  • ISSN号:1006-687X
  • 期刊名称:《应用与环境生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:TQ925[轻工技术与工程—发酵工程;化学工程] Q936[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,无锡 214122
  • 相关基金:教育部新世纪优秀人才计划项目(NCET-10-04.59)、国家重点基础研究发展计划(“973”计划)项目(2012CB725202)、国家高技术研究发展计划(“863”计划)项目(2011AA02A211)、国家自然科学基金项目(21276110,30970056)、高等学校博士学科点专项科研基金项目(20110093120001)、中央高校基本科研业务费专项资金项目(JUSRP31001)和江苏高校优势学科建设工程项目资助
中文摘要:

为丰富产耐热β-淀粉酶菌种资源,从土样中筛选得到高产淀粉酶菌株B10-54,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。经硫酸铵沉淀、阴离子交换柱分离纯化获得β-淀粉酶,测定其最适作用温度为65 ℃,最适pH为6.0,Ni2+、Mg2+离子对其酶活有促进作用。对B10-54发酵产β-淀粉酶进行优化,确定最适培养基碳氮源为木薯粉2%、豆粕粉4%,最适发酵条件为初始pH 7.0、温度37 ℃、转速190 r/min、接种量4%,摇床培养64 h后酶活力可达6 724 U/mL,比优化前提高了3.06倍。在装液量为2.5 L的5 L发酵罐中发酵,转速350 r/min,通气量1 L L-1 min-1,控制pH在6.5-7.5之间,发酵48 h后酶活可达最高酶活6 920 U/mL,比摇瓶培养缩短了发酵时间。因此菌株B10-54产耐热β-淀粉酶并可利用廉价原料木薯、豆粕粉发酵,可大大降低生产成本。图7 表4 参22

英文摘要:

A high-yield amylase strain B10-54 was isolated from the soil in order to enrich the resources of β-amylase producing strains. The strain B10-54 was identified as a species of Bacillus subtilis by traditional physiological experimental method and 16S rRNA analysis. The single-factor and orthogonal experiments were performed to determine the optimal conditions for enzymatic production. The target enzyme β-amylase was purified by ammonium sulfate precipitation and Q Fast Flow-sepharose ion-exchanger chromatography. The temperature optima of the purified β-amylase was 65 ℃ and the optimum pH was 6.0. The β-amylase activity could be obviously stimulated by Ni2+, Mg2+. The optimal carbon source and nitrogen source were 2% cassava flour and 4% soybean dreg. The fermentation conditions were initial pH7.0, fermentation temperature 37 ℃, rotation speed 190 r/min with 4% inoculation volume. After 64 h fermentation, the enzyme activity was as high as 6 724 U/mL, 3.06 times higher than before. The conditions of B10-54 in 5 L fermentor were liquid volume 2.5 L/5 L, 1 L L-1 min-1, stirring speed 350 r/min, pH controlled between 6.5-7.5. The enzyme activity was 6 920 U/mL after only 48 h, a much shorter growth time than before. B10-54 strain produces thermostable β-amylase from cheap material such as cassava and soybean dreg to reduce production cost, therefore should be further studied. Fig 7, Tab 4, Ref 22

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期刊信息
  • 《应用与环境生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院成都生物研究所
  • 主编:吴宁
  • 地址:成都市人民南路4段9号
  • 邮编:610041
  • 邮箱:biojaeb@cib.ac.cn
  • 电话:028-82890917
  • 国际标准刊号:ISSN:1006-687X
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1482/Q
  • 邮发代号:62-15
  • 获奖情况:
  • 中国农业期刊金犁奖学术类一等奖(2006),* 中国期刊方阵双效期刊(2002年),* 四川省第二届优秀期刊(2000年),* 四川省一级学术期刊(1998年)
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:23016