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PTEN重组腺病毒载体的构建及其在气道平滑肌细胞的表达
  • ISSN号:1673-4254
  • 期刊名称:南方医科大学学报
  • 时间:0
  • 页码:859-863
  • 语言:中文
  • 分类:R730.49[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]南昌大学第二附属医院重症医学科,南昌330006, [2]南方医科大学南方医院呼吸内科,广州510515, [3]南方医科大学南方医院心内科实验室,广州510515
  • 相关基金:国家自然科学基金(30770936)
  • 相关项目:肿瘤抑制基因PTEN对人气道平滑肌增殖、凋亡和迁移的影响
中文摘要:

目的:观察肿瘤抑制基因 PTEN 对人气道平滑肌细胞(HASMCs)迁移和增殖的影响机制。方法用重组PTEN 腺病毒转染体外培养的 HASMCs(Ad-PTEN 组),并与携带绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒空载体(Ad-GFP组)和空白对照(MOCK)组对比,采用 MTS 测定细胞增殖、Transwell 法观察细胞迁移、共聚焦显微镜观测细胞骨架的变化、免疫印迹法检测 PTEN、p-Akt、Akt、p-FAK、FAK 蛋白的表达。结果Ad-PTEN 组的吸光度(A)值和每单位面积迁移的细胞数显著低于 Ad-GFP 及 MOCK 组(均 P <0.05),Ad-GFP 和 MOCK 两对照组间差异无统计学意义(P >0.05),提示过表达 PTEN 基因能抑制 HASMCs 的增殖和迁移的作用。Ad-PTEN 组细胞轮廓变细,伪足及应力纤维明显变少,而 Ad-GFP、MOCK 组细胞有少量短而细的应力纤维,很少丝状伪足形成。与 Ad-GFP 及 MOCK 组比较,Ad-PTEN 组 p-Akt 表达水平和 FAK 蛋白的磷酸化水平显著下调(均 P <0.05),Ad-GFP及 MOCK 两对照组间差异无统计学意义(P >0.05),说明过表达 PTEN 能下调 Akt 蛋白和 FAK 蛋白的磷酸化水平。结论过表达 PTEN 可能通过下调 p-Akt 及 p-FAK 的表达,抑制 HASMCs 的增殖和迁移,参与哮喘气道重塑的调控。

英文摘要:

Objective To investigate the mechanism for the effect of tumor suppressor gene PTEN on migration and proliferation of human airway smooth muscle cells (HASMCs).Methods HASMCs were transfected with recombinant adenoviruses encoding human wild-type PTEN cDNA (Ad-PTEN group),GFP-labeled adenovirus vectors (Ad-GFP group)and mock adenoviru-ses (MOCK group),respectively.Cell proliferation was assessed by MTS assay.Cell migration was analyzed using Transwell chamber apparatus.The rearrangement of cell actin cytoskeleton was observed by laser scanning confocal microscope.The protein expression of PTEN,p-Akt, Akt,p-FAK and FAK were measured by Western blotting.Results Compared with Ad-GFP group or MOCK group,the absorbance value,number of migrated cells per unit area and levels of p-Akt and p-FAK protein significantly decreased in Ad-PTEN group (P 0.05).In addition,Ad-PTEN transfection diminished cell outline and reduced the pseudopodium and stress fibers.However,cells in Ad-GFP group and MOCK group had a small amount of short and thin stress fibers with few filiform pseudopodia.Conclusion The overex-pression of PTEN gene inhibits the migration and proliferation of HASMCs through down-regu-lating the expression of p-Akt and p-FAK.Therefore,PTEN may be involved in the regulation of airway remodeling in asthma.

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期刊信息
  • 《南方医科大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:广东省教育厅
  • 主办单位:南方医科大学
  • 主编:陈敏生
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  • 邮编:510515
  • 邮箱:xbbjb@fimmu.com
  • 电话:020-61648175 61647352
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-4254
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1627/R
  • 邮发代号:46-10
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:25001