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hGITRaa1-165-IgG1Fc真核表达质粒的构建及其表达
  • ISSN号:1671-7783
  • 期刊名称:《江苏大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R392.11[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学系,江苏镇江212013, [2]江苏大学附属人民医院检验科,江苏镇江212002
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30300169);江苏省卫生厅面上项目(H200859);江苏大学高级人才基金资助项目(05JDG042);江苏大学拔尖人才培养工程资助项目
中文摘要:

目的:构建含有人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)胞外段基因的真核表达质粒hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达。方法:以pGEMT-GITR质粒为模板,通过PCR扩增获得人GITR胞外段的基因hGITRaa1-165,将该目的基因连接至IgG1Fc-pcDNA3.1(+)质粒,构建hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+)真核表达质粒。将该重组质粒采用脂质体法转染COS-7细胞,通过SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达。结果:成功构建真核表达质粒hGI-TRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),并在其转染的COS-7细胞培养上清中检测到hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白的表达。结论:成功表达hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白,为进一步研究GITR的生物学功能奠定了基础。

英文摘要:

Objective: To constructed recombinant eukaryotic plasmid hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),then to express the fusion protein hGITRaa1-165-IgG1Fc in COS-7 cells.Methods: The hGITRaa1-165 gene was obtained by PCR amplification from the pGEMT-GITR vector and inserted into the vector hIgG1Fc-pcDNA3.1(+).The COS-7 cells were transfected in the mediation of liposome mixed with hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+)vector,the fusion protein hGITRaa1-165-IgG1Fc in the culture supernatant was analyzed by SDS-PAGE and Western blots. Results: The hGITRaa1-165-IgG1Fc fusion protein was analyzed in the culture supernatant in the COS-7 cells which were transfected with the hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+) vector. Conclusion: The fusion protein hGITRaa1-165-IgG1Fc was successfully expressed in COS-7 cells,providing research foundation for biology of hGITR.

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期刊信息
  • 《江苏大学学报:医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:江苏大学
  • 主编:许化溪
  • 地址:江苏省镇江市梦溪园巷30号
  • 邮编:212003
  • 邮箱:
  • 电话:0511-84446824
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-7783
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1669/R
  • 邮发代号:28-192
  • 获奖情况:
  • 1995年、1999年被评为江苏省优秀学报
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊
  • 被引量:6001