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鱼肠道弧菌单克隆抗体的制备及应用
  • ISSN号:2095-1388
  • 期刊名称:《大连海洋大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S948[农业科学—水产养殖;农业科学—水产科学]
  • 作者机构:[1]青岛农业大学海洋科学与工程学院,山东青岛266109, [2]淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室,江苏连云港222005
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30901106);江苏省水产三项工程项目(PJ2010-58,DY2012-3-7);连云港市科技攻关项目(CG1134);青岛农业大学高层次人才科研基金资助项目(630701)
中文摘要:

以鱼肠道弧菌Vibrio ichthyoenteri为抗原免疫小鼠,用PEG法将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,分别采用酶联免疫吸附(ELISA)技术和间接免疫荧光抗体(EFAT)技术筛选强阳性杂交瘤细胞株,亚克隆阳性细胞株,获得5株抗鱼肠道弧菌单克隆抗体(1C6、1D8、2D7、2D10、2E3)。Western blotting分析结果显示,单抗2D10与相对分子质量为44200、36700的鱼肠道弧菌蛋白发生特异性结合;用流式细胞术(FCM)检测单抗强度,结果显示阳性荧光比例为13.63%,阴性对照荧光比例不足l%;人工感染牙鲆试验结果表明,运用该单抗能够建立鱼肠道弧菌的决速诊断方法。

英文摘要:

Five monoelonaI antibodies (MAbs) ( 1 C6,1D8,2D7,2D10,2E3 ) against Vibrio ichthyoenteri as a pathogen in marine animals were produced from hybridoma cells through Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) and Indirect Immunofluorescenee Assay Test (IFAT) by immunised Balb/C mice. The western blotting revealed that the protein of V. ichthyoenteri was shown to have molecular weight of 44 200 and 36 700, and the flow- ing cytometry (FCM) analysis showed that the MAb 2D10 reacted with positive cells had positive percent of 13.63%, and negative percent of less than 1%. Artificial infection experiment proved that the application of mono- clonal antibody provided a method for the early diagnosis of V. ichthvoenteri.

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期刊信息
  • 《大连海洋大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:辽宁省教育厅
  • 主办单位:大连海洋大学
  • 主编:姚杰
  • 地址:大连市黑石礁街52号
  • 邮编:116023
  • 邮箱:xuebao@dlou.edu.cn
  • 电话:0411-84762672
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-1388
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1575/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 1995年全国高等学校自然科学学报系统优秀学报评比...,1995年全国高等农业院校学报“三优”评比一等奖,1998年全国优秀高校自然科学学报及教育部优秀科技...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:1605