选择我国重要海水经济鱼类-牙鲆为对象,通过离体研究、腹腔注射和摄食生长实验相结合,测定牙鲆细胞免疫、体液免疫、免疫基因表达和感染病毒后死亡率,确定促进牙鲆免疫力和抗病力的核苷酸种类、剂量、投喂频率及核苷酸调控牙鲆免疫力的敏感指标;克隆与核苷酸免疫相关的受体,测定相关免疫基因表达和牙鲆感染病毒后的抗病毒基因,建立核苷酸和牙鲆免疫力和抗病力之间的关系,阐明核苷酸对牙鲆免疫力和抗病力的影响机理,为鱼类免疫增强剂作用机理的研究提供依据。
Japanese flounder;nucleotide;immunity;disease resistance;mechanism
选择我国重要海水经济鱼类—牙鲆为对象,使用不同浓度的单一核苷酸,通过离体研究、腹腔注射和摄食生长实验相结合,测定牙鲆细胞免疫、体液免疫、免疫基因表达和感染病毒后死亡率等相关免疫指标来研究核苷酸对牙鲆免疫力影响的机理,研究结果首次确定了(1)在体外培养条件,嘧啶核苷酸对牙鲆头肾巨噬细胞的免疫力有显著地影响,其中胞嘧啶核苷酸与尿嘧啶核苷酸对牙鲆头肾巨噬细胞免疫力影响显著,在设置的核苷酸浓度梯度内,浓度为10mg/ml实验组的免疫力显著高于其他实验组。但随着核苷酸浓度的增大,核苷酸对免疫细胞的免疫抑制作用增强。在试验浓度梯度内,当核苷酸浓度达到100mg/ml时,免疫抑制作用最为明显。胸腺嘧啶核苷酸与其他两种嘧啶核苷酸不同,其对牙鲆头肾巨噬细胞免疫促进作用影响不明显。(2)在离体实验的基础上进行的腹腔注射和摄食实验结果显示,在实验梯度范围内,10mg/ml的胞嘧啶核苷酸、0.1mg/ml胸腺嘧啶核苷酸和1mg/ml和10mg/ml尿嘧啶核苷酸浓度实验组牙鲆的免疫力和抗病力效果显著,而高浓度的核苷酸对牙鲆免疫力和抗病力同样具有较为显著地抑制作用;不同阶段取样结果表明,随着实验周期的延长,核苷酸对牙鲆的免疫作用效果有减弱的趋势,如腹腔注射胸腺嘧啶后随着时间的增加,其影响逐渐减小,到第四周后牙鲆免疫活力与对照组相比差异不显著。上述结果初步建立核苷酸和牙鲆免疫力和抗病力之间的关系,基本阐明核苷酸对牙鲆免疫力和抗病力的影响机理,为鱼类免疫增强剂作用机理的研究提供依据。