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连续贴壁法分离培养人外周血来源树突状细胞及其超微结构的观察
  • ISSN号:1672-4992
  • 期刊名称:《现代肿瘤医学》
  • 时间:0
  • 分类:R730.51[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]第四军医大学病理教研室,陕西西安710032, [2]第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所,陕西西安710038
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30400167)
中文摘要:

目的:改进人外周血单个核细胞分离培养树突状细胞的方法,电镜观察树突状细胞超微结构。方法:利用连续贴壁法分离获得CD14^+前体细胞,经人重组粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF)、白介素-4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF—α)诱导产生成熟DC,流式细胞仪检测DC表面标志物表达水平,透射电镜(TEM)观察树突状细胞超微结构。结果:连续贴壁法体外分离培养人外周血DC,所获得DC数量和纯度均都多于以往一次贴壁分离培养的DC。培养1周的DC高表达CD1a、CD40、HLA—DR、CD80、CD86。透射电镜观察到不同状态树突状细胞的超微结构。结论:连续贴壁法可分离培养数量较大、纯度较高的人外周血来源DC。

英文摘要:

Objective: To improve the method of isolated cultivation of dendritic cells (DC) from the peripheral blood and observe the utralmicrostructure of dendritic cells with electron microscope, Methods: Utilizing successive adherence method to obtain CD14^+ precursor cells, The mature DC was induced in vitro by granuloeyte - macrophage colony - stimulating factor ( GM - CSF), interleukin - 4 ( IL - 4 ) and tumor necrosis factor - α ( TNF - α ). Detecting the expression level of DC surface markers by flow cytometry. Observing the utralmicro structure of dendritic cells with transmission electron microscope (TEM). Results: A large number of of DC with higher purity that were isolated from human peripheral blood in successive adherence method were obtained compare with one time - adhenrence method. The DC cultured one week highly expressed CD1 a, CD40, HLA - DR, CD83 and CD86. We observed the utralmicrostructure of dendritic cells in different state with transmission' electron microscope ( TEM ). Conclusion: We can get comparatively large number of DC with high purity in successive adherence method.

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期刊信息
  • 《现代肿瘤医学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:陕西省科学技术协会
  • 主办单位:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 (西安交通大学附属陕西省肿瘤医院)
  • 主编:李树业
  • 地址:西安市雁塔西路309号陕西省肿瘤医院内
  • 邮编:710061
  • 邮箱:sxzlyx@263.net
  • 电话:029-85277356
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-4992
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1415/R
  • 邮发代号:52-297
  • 获奖情况:
  • 获《CAJ-CD规范》执行优秀期刊奖,陕西省优秀科技期刊一等奖,中国抗癌协会优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:30005