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灵芝lz8基因的克隆和原核表达及LZ-8蛋白的免疫印迹检测
  • ISSN号:1672-6472
  • 期刊名称:《菌物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q939.93[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室,南京210095
  • 相关基金:国家自然科学基金(30300006,30571294)和江苏省自然科学基金创新人才项目(BK2006517)资助
中文摘要:

根据已报道的lz8基因序列设计引物,以灵芝基因组DNA为模板,PCR扩增获得lz8基因。构建了原核表达载体pET30a-lz8,转化原核表达宿主菌Rosetta DE3,IPTG诱导融合蛋白表达,并用Ni—NTA亲和层析柱对LZ-8蛋白进行分离纯化。将纯化的LZ-8蛋白用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内,经数次加强免疫后采血分离抗血清,并以抗血清为探针建立了LZ-8蛋白的免疫印迹法定性检测方法。

英文摘要:

The detection of LZ-8, an immunomodulatory protein from Ganoderma lucidum, with immunoblot was investigated. The DNA encoding LZ-8 was cloning by PCR using the total DNA of Ganoderma lucidium as template. The lz8 gene was inserted into plasmid pET-30a and transformed into Rosetta DE3. LZ-8 was purified by Ni-NTA from the lysate of bacteria with pET3Oa-lz8 after IPTG induction. Purified LZ-8 emulsified with Freund's adjuvant was injected subcutaneously into New Zealand white rabbits. After several immune enhancements, these animals were bled and sera were separated. Antiserum against LZ-8 in western blot was applied to determine the presence of LZ-8.

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期刊信息
  • 《菌物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国菌物学会
  • 主编:戴玉成
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所B401
  • 邮编:100101
  • 邮箱:jwxt@im.ac.cn
  • 电话:010-64807521
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-6472
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5180/Q
  • 邮发代号:2-499
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:5637